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大量
- 英文名:
DAB显色试剂盒
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
见详细说明书
- 规格:
50ml/100ml
产品简介:
DAB 辣根过氧化物酶显色试剂盒(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一种借助辣根过氧化物酶(HRP),用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA 等膜显色的试剂盒。DAB,即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride,是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶的催化下,DAB 会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。因此在DAB 显色后,还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。
本试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色,也可以用于Western 等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。用于免疫组化或原位杂交时,如果每个片子使用0.2 毫升显色液,那么本试剂盒共可以检测100 个片子。
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文献和实验。6)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃ 20 分钟。10)PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃ 20 分钟。12)PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13)DAB 显色:DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明
或细胞中目的抗原表达水平低:可延长DAB显色时间或延长二抗孵育时间。 (3)试剂超过有效使用期:及时更换试剂。 (4)操作中,滴加试剂时缓冲液未沥干,致使试剂稀释:可每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液(但防止切片干燥)。 (5) 蛋白封闭过度:封闭时间不要超过 2h。 Q3:为什么出现高背景染色,怎么办? (1)一抗浓度过高:对抗体进行滴定以确定获得特异性反应的最佳浓度。 (2)显色过度:缩短显色试剂 DAB 孵育时间。 (3)洗涤不充分:适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间。 (4)封闭
3A7)XP® Rabbit mAb#9145 检测 p-Stat3 的表达,使用不同的产品进行显色。与竞争者的 DAB 产生的信号相比,SignalStain® DABSubstrateKit 的显色强度更佳。CST 对实验细节进行了步步优化,抗体说明书也是为实验成功保驾护航的必备指南:注:使用 PLK1(208 G4)Rabbit mAb #4513 检测人结肠肿瘤中 PLK1 的表达,在经过辅助试剂的步步优化后发现,使用一抗稀释液#8112 稀释抗体,聚合物型二抗#8114 进行检测,DAB 显色试剂
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