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Red Blood Cell Lysing Buffer Hybri-Max™
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嵘崴达
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100ML
红细胞裂解缓冲液Hybri-Max™
Red Blood Cell Lysing Buffer Hybri-Max™
liquid, sterile-filtered, suitable for hybridoma
别名: RBC裂解缓冲液
Application
建议在细胞颗粒中加入1 mL缓冲液(细胞颗粒=1个脾脏或1-2亿个细胞)。 轻轻混合1分钟。 用15-20mL培养基活盐溶液稀释该缓冲液。 在250-500 × g 离心7分钟并弃去上清。 细胞可被稀释并准备计数或融合。 如果裂解不完全,可重复1-4步。
Biochem/physiol Actions
红细胞裂解缓冲液已被开发用于杂交瘤实验中,用于在融合前从小鼠脾细胞悬液中去除红细胞。 在需要从细胞悬液(如全血)中去除红细胞的体系中,它也很有用。
Components
含8.3 g/L 氯化铵的0.01 M Tris-HCl 缓冲液。
上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
THERMO试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
ABCAM试剂,国内现货三天左右,期货四周左右。
Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
OXOID,BD培养基货期八周左右,部分现货。
MCE激动剂,ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验线,以0为控制下限,R×3.27为控制上限。这种质控图的优点是可区分均值变异(x图)及精密度变异(R图)。表1为x-R质控图绘制方法示例 步骤1.整理数据,列表 步骤2.计算 总均值(x)=(144+146+142+————————————————+146)/20=73.25 极差(R)=max{x}-min{x} 极差均值(R)=(4+2+2+————————————+2)/20=2.85 步骤3.确定控制界限 x控制
。 加入2 mL 1×红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解2~3 min后,立马加入10 mL PBS,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬脾脏细胞,将细胞悬液用200目筛网再次过滤后计数, 并调整细胞浓度至1×107/mL。 b) 吹打法 小鼠颈椎脱臼处死,置于75%乙醇浸泡5 min后,取出小鼠,置于无菌操作台上,左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口,撕开皮肤,暴露腹壁,可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜,剪开后上翻,暴露出脾脏,用镊子提起脾脏,眼科剪分离脾脏下面
),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意在该过程中应保留尽可能多的骨髓腔。 拿一支1 mL的无菌注射器,吸取1 mL PBS,轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓。重复2~3次,可冲出绝大部分细胞。冲洗完后,用移液器轻轻吹打细胞,将细胞团吹散。 将冲洗液用200目的滤网过滤,滤液收集于15 mL离心管中,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,细胞计数,并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项: 骨髓样本细胞分群明显,可以裂解红细胞,也可不裂解。如需裂解红细胞,可以加入
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