D3/25 HVD3 ELISA试剂盒

产品概述

人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒ELISA试剂盒是本公司自主研发的高灵敏度酶联免疫检测试剂盒，专门用于定量检测人样本中的25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒含量。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，具有灵敏度高、特异性好、重复性优等特点，广泛应用于25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒相关的基础医学研究、药物开发及临床检测等领域。

产品参数

产品名称	人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒ELISA试剂盒
检测物种	人(Human)
检测靶标	25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒/25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒
检测方法	双抗体夹心ELISA法
标记物	HRP
检测范围	详见产品标签
灵敏度	高灵敏度
样本类型	细胞培养上清、血清、血浆、尿液、组织样本等
保存条件	2-8℃避光保存
有效期	6个月

检测原理

人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测人样本中的25羟基维生素D3(25(OH)D3含量。微孔板预包被抗人25羟基维生素D3(25(OH)D3捕获抗体，加入标准品或样本后，25羟基维生素D3(25(OH)D3与捕获抗体结合；再加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-25羟基维生素D3(25(OH)D3-酶标抗体复合物；加入TMB底物显色，终止反应后测定吸光度值。吸光度值与样本中25羟基维生素D3(25(OH)D3浓度呈正相关，通过标准曲线计算待测样本中人25羟基维生素D3(25(OH)D3的含量。

操作步骤

1. 准备：将人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒ELISA试剂盒各组分恢复至室温(18-25℃)，按需配制洗涤液工作液。
2. 加样：分别在标准品孔和样本孔中加入100μL标准品或待测样本，37℃孵育90分钟。
3. 洗板：甩去孔内液体，每孔加入洗涤液，静置后甩去，重复5次。
4. 加检测抗体：每孔加入100μL HRP标记检测抗体工作液，37℃孵育60分钟。
5. 洗板：重复洗涤5次。
6. 显色：每孔加入TMB底物溶液100μL，37℃避光孵育15-20分钟。
7. 终止：每孔加入终止液50μL，轻轻混匀。
8. 测定：在450nm波长下测定各孔吸光度值(OD值)。

适用样本

本试剂盒适用于以下样本类型的检测：上海淳麦。样本应按照规定条件采集和处理，避免反复冻融。具体样本制备要求详见"样本制备"章节。

样本制备

血清样本：采集人全血，室温静置30分钟后3000rpm离心10分钟，取上清液检测。
血浆样本：使用EDTA抗凝采血管采集人全血，3000rpm离心10分钟，取上清液。
组织匀浆样本：取人组织加入PBS匀浆，4℃离心取上清液检测。
细胞上清液：收集细胞培养上清液，离心去除细胞碎片后取上清检测。
样本若不及时检测，请分装后-20℃冻存，避免反复冻融。

保存条件

人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒ELISA试剂盒请在2-8℃避光条件下保存，有效期6个月。请勿冷冻保存，使用后请及时将剩余试剂放回2-8℃。TMB底物溶液请避光保存，显色反应需在暗处进行。

应用领域

人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒ELISA试剂盒广泛应用于以下研究领域：维生素代谢研究、骨代谢研究、营养学研究、免疫调节研究、钙磷代谢研究等。

关键词

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结果计算

结果计算 1. 根据标准品浓度及对应的OD值，绘制标准曲线（建议使用四参数逻辑回归或二次曲线拟合）。 2. 将待测样本的OD值代入标准曲线方程，计算对应的浓度值。 3. 若样本经过稀释，需将计算结果乘以稀释倍数，得到样本中待测物的实际浓度。 4. 标准曲线R²值应≥0.99，否则需重新实验。

注意事项

注意事项 1. 本试剂盒仅供科研使用，不可用于临床诊断。 2. 实验操作需在室温(18-25℃)下进行，试剂使用前需恢复至室温。 3. 洗涤步骤对实验结果影响较大，请确保洗涤充分。 4. TMB底物溶液需避光保存，显色反应需在暗处进行。 5. 终止液具有腐蚀性，操作时请注意防护。 6. 每个样本建议做复孔检测，确保结果可靠性。

常见问题(FAQ)

常见问题 Q1：试剂盒的有效期是多久？ A1：试剂盒在2-8℃避光保存条件下有效期为6个月，请勿冷冻保存。 Q2：样本如何保存？ A2：新鲜样本建议即时检测；若需保存，血清/血浆请分装后-20℃冻存，避免反复冻融。组织样本匀浆后-80℃保存，一周内完成检测。 Q3：标准曲线R²值低于0.99怎么办？ A3：请检查标准品是否过期或污染、加样是否准确、洗涤是否充分。建议重新配制标准品并严格按照操作步骤操作。 Q4：不同批次的试剂盒可以混用吗？ A4：不可以。不同批次的试剂组分可能存在差异，请使用同一批次试剂盒内的所有组分。 Q5：样本需要稀释吗？ A5：如果样本中待测物浓度超出检测范围上限，需使用试剂盒配套的稀释液进行适当倍数稀释后检测。