E-64, Protease Inhibitor

E-64

N-[N-(L-3-Trans-carboxirane-2-carbonyl)-L-leucyl]-agmatine

Specificity

硫醇蛋白酶抑制剂E-64可特异性的抑制木瓜蛋白酶和其他半胱氨酸蛋白酶，如组织蛋白酶B和L、菠萝蛋白酶和丝蛋白。组织蛋白酶A和D不会被抑制。来自猪心脏的L-乳酸脱氢酶并没有被抑制，尽管该酶含有一个官能化的巯基。

Application

E-64在蛋白和酶的分离和纯化过程中可用于抑制木瓜蛋白酶和其他半胱氨酸蛋白酶，如组织蛋白酶B和L、菠萝蛋白酶和丝蛋白。
它已被用于亲和色谱来纯化血红蛋白受体。
E-64对巯基蛋白酶的抑制似乎在SH组分之间具有非竞争性。抑制作用也是不可逆的，并在凝胶过滤（Sephadex色谱柱）或木瓜蛋白酶与E-64孵育后的透析后发生改变。酶和抑制剂是以等摩尔的比例结合的。

E-64是亲和纯化半胱氨酸蛋白酶的有效配体。当与硫醇化亲和基质偶联时，结合将成为可逆的，但保留了特异性。

Biochem/physiol Actions

E-64是一种不可逆的、强效的、高选择性半胱氨酸蛋白酶抑制剂。E-64不与非蛋白酶的功能性硫醇基团反应，如 L-乳酸脱氢酶或肌酸激酶。与亮抑酶肽和抗蛋白酶肽等其他半胱氨酸蛋白酶抑制剂不同，E-64不会抑制丝氨酸蛋白酶（胰蛋白酶除外）。E-64的反式环氧琥珀酰基（活性部分）不可逆地与许多半胱氨酸蛋白酶的活性巯基结合，如木瓜蛋白酶、猕猴桃酶和组织蛋白酶B、H和L，从而形成硫醚键。 E-64是一种非常有用的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，具有特异性抑制作用，在细胞和组织中具有渗透性，毒性低，可用于 体内 研究。