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- Roche
- 11873580001
- 2025年11月14日
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2-8°C
- 英文名：
cOmplete™, EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail
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- 供应商：
嵘崴达
- 规格：
20 TABLETS
不含EDTA的cOmplete™蛋白酶抑制剂混合物
cOmplete™, EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail
Tablets provided in glass vials
General description
不含EDTA的cOmplete蛋白酶抑制剂片剂可抑制广泛的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。与其他cOmplete片剂相比，它们不含EDTA，可保持金属依赖性蛋白质的稳定性和功能不受影响。利用IMAC（固相金属亲和色谱）进行的多聚His标签融合蛋白亲和纯化也得到了简化（无需透析）。
由于优化了片剂的成分，它们对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有出色的抑制作用，并且非常适合保护从动物组织、植物、酵母和细菌中分离的蛋白质。不含EDTA的cOmplete片剂同时含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制剂。金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。
不含EDTA的cOmplete片剂与cOmplete片剂相同，唯一的区别是不包含EDTA或其他螯合剂（例如 EGTA）。
Specificity
Inhibits serine proteases, cysteine proteases. Does not inhibit metalloproteases.
Application
cOmplete™, EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail has been used as a component of radioimmunoprecipitation assay (RIPA) lysis buffer for resuspending Chinese hamster ovary (CHO) cells. It has also been used as a component of resuspension buffer for HCT116 colorectal cancer cells.
cOmplete™, EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail has been used as as a component of
• immunoprecipitation lysis buffer (IPLS) for lysis of human embryonic kidney cells 293 (HEK293T cells) for glutathione co-precipitation
• radioimmunoprecipitation assay (RIPA) buffer for lysis of cells for western blotting
• buffer A for the lysis of bacterial cells
cOmplete™, 不含EDTA可用于细菌、酵母、植物以及动物细胞提取物中的丝氨酸及半胱氨酸蛋白酶抑制。
不含EDTA的cOmplete片剂可用于抑制较大体积（高达50 ml）中的蛋白水解活性，其中EDTA可能干扰蛋白质稳定性（例如，含金属的蛋白质）或随后的检测。由于EDTA会对IMAC（固相金属亲和色谱）产生感染，cOmplete，不含EDTA更适合用于多聚His标签融合蛋白的分离过程。
如需在更小的体积（ 达10 ml）内对蛋白酶活性进行抑制，我们推荐使用不含EDTA的cOmplete Mini。
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文献和实验，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该
2）。 图2 使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit得到＞80％的靶定基因阻断 经Dicer酶切的，来源于β-半乳糖苷酶或者荧光素酶的dsRNA产生siRNA（d-siRNA）库，用来确定d-siRNA特异阻断基因活性的效果。GripTite™ 293 MSR 细胞共转染pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ阳性对照质粒和pcDNA™5/FRT/luc，分别独自表达β-gal或者荧光素酶报告子，或者50ng luc 或者lacZ d-siRNA。对于每一种报告子
份都稳定和无毒，能提供安全和可靠的保护，这种混和片有不含EDTA的配方，这样就更不会影响依赖金属的蛋白的活性，并可确保有效进行一些纯化工作（如应用Poly-His）标记的蛋白）。 其实重要的是这种片剂操作方便：只要将一片completeTM 加进缓冲液，便可抑制多种不同的蛋白酶，有效地保护目的蛋白，效果明显，免除了称量个别抑制剂的麻烦。一举两得，何乐而不为呢？ 另外针对磷酸酶，罗氏也推出了一种PhosSTOP磷酸酶抑制剂混合片（可以与complete蛋白酶抑制剂兼容
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