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合研生物
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Caco-2通透性与转运体试验
武汉合研生物医药科技有限公司坐落于光谷生物城,是一家专注于提供新药发现阶段的技术服务,以中小微新药研发企业为服务主体的创新型公司。合研生物拥有一支训练有素的药物研发技术团队,提供的服务覆盖虚拟筛选、酶学靶点筛选、抗肿瘤药物活性评价、细胞功能学检测、药理病理学服务等各项技术,同时也代理SignalChem的各种活性酶产品。我们的技术团队在分子生物学、细胞生物学、结构生物学等领域具有丰富的经验,通过酶水平、细胞水平测定等技术平台帮助客户进行化合物筛选及化合物特性、作用机制等研究。合研生物以高效、高性价比的专业服务帮助客户更快地达到目标,帮助客户推进药物发现的进程。
我们的优势
可开展各项体外药代动力学,主要以Caco-2细胞模型为主,研究药物渗透与转运功能。
Caco-2 通透性与转运体试验
须注明单向/双向
周期一般4-6周
Caco-2细胞模型建立大致步骤:
1、细胞的培养及接种铺板
2、检测电阻
Caco-2细胞培养21天,检测电阻。
3、通透性实验
首先弃去Transwell小室内外培养液,用37℃ Hanks液(PH=7.4)轻柔地清洗细胞表面3次以除去表面的杂质,然后加入37℃ Hanks液,置于37℃孵箱中孵育30分钟。吸去缓冲溶液,在AP侧(内孔)加入Xml含有受试药物的Hanks液,作为供给液,在BL侧(外孔)加入Ym1空白的Hanks液作为接收液。此为吸收方向,A-B。
4、外排实验
弃去Transwell小室内外培养液,在BL(外孔)侧加入Yml含有受试药物的Hanks液,作为供给液,在AP侧(内孔)加入Xm1空白的Hanks液作为接收液。此为外排方向,B-A。
5、采样和检测
将载有Transwell小室的24孔板于37℃中温孵,设定不同时间点时间从接受池取出Zul的接受液进行液相检测,然后补加相应体积的空白37℃ Hanks液。
6、双向转运实验
相同药物同时进行通透性实验和外排实验,考察药物的渗透方向率(PDR)。
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文献和实验-100g氨基酸,50-100g离子等。实际上,小肠吸收的能力远远超过这个数字,因此,小肠的吸收具有巨大的贮备力。 (一)水分的吸收 前已述,人每日由胃肠吸收回体内的液体量约有8L之多。水分的吸收都是被动的,各种溶持,特别是NaCI的主动吸收所产生的渗透压梯度是水分吸收的主要动力。细胞膜和细胞间的紧密连接对水的通透性都很大,因此,驱使水吸收的渗透压一般只有3-5mOs/L。 在十二指肠和空肠上部,水分由肠腔进入血液的量和水分由血液进入肠腔的量都很大,因此肠腔内液体的量减少得并不
时间: 悬浮肝细胞6个小时就会丧失活性,因此只能用于短期实验(以小时为单位)研究,比如药物摄取,代谢稳定性和代谢物性能分析。贴壁的肝细胞可以存活几天或者 几周的时间(大于7天),可以用于长期代谢研究、体外肝毒性研究、代谢依赖的药物毒性研究、实验依赖的抑制实验研究、酶诱导研究和外排转运体研究。 C高存活率: 通常情况>90% D高贴壁率: 将近100% E具有对CYP1A2, CYP2B6 和CYP3A4等酶的诱导性和反应性 F完整的摄取转运体和外排转运体活性 当然,如果控制成本就要考虑的细
浓度的调节,主要是通过胰岛素、胰高血糖素、肾上腺素、糖皮质激素、生长激素及甲状腺激素之间相互协同、相互拮抗以维持血糖浓度的恒定。激素对血糖浓度的调节。 肝脏是调节血糖浓度的最主要器官。血糖浓度和各组织细胞膜上葡萄糖转运体(glucose transporters)是器官水平调节的两个主要影响因素,此时细胞膜上葡萄糖转运体家族有GLUT1-5,是双向转运体。在正常血糖浓度情况下,各组织细胞通过细胞膜上GLUT1和 GLUT3摄取葡萄糖作为能量来源;当血糖浓度过高是,肝细胞膜上的GLUT2起作用









