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- 2026年01月10日
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- 提供商：
合研生物
- 服务名称：
CRISPR Cas9 基因编辑
武汉合研生物医药科技有限公司坐落于光谷生物城，是一家专注于提供新药发现阶段的技术服务，以中小微新药研发企业为服务主体的创新型公司。合研生物拥有一支训练有素的药物研发技术团队，提供的服务覆盖虚拟筛选、酶学靶点筛选、抗肿瘤药物活性评价、细胞功能学检测、药理病理学服务等各项技术。我们的技术团队在分子生物学、细胞生物学、结构生物学等领域具有丰富的经验，通过酶水平、细胞水平测定等技术平台帮助客户进行化合物筛选及化合物特性、作用机制等研究。合研生物以高效、高性价比的专业服务帮助客户更快地达到目标，帮助客户推进药物发现的进程。
我们的优势
CRISPR Cas9
CRISPR/Cas9 基因编辑
合研生物具有先进的基因操作技术平台，为客户提供全面的基因操作方案。包括：
DNA水平的基因敲除，基因敲入，基因过表达和
RNA水平的siRNA干扰和shRNA干扰。
DNA水平编辑
基因敲除/敲入细胞系构建
●基因敲除（单基因，多基因）
●基因组敲入（基因突变，基因标记
基因过表达技术服务
●过表达载体构建（普通载体，慢病毒，腺病毒，腺相关病毒）
●过表达效果检测（WB, Real-Time PCR, Functional Assay ）
●过表达细胞系筛选（单克隆细胞系）
RNA水平干扰
siRNA
●siRNA设计合成
●siRNA转染及效果检测（WB，Real-Time PCR）
shRNA
●shRNA转染及效果检测（WB，Real-Time PCR）
●shRNA病毒包装（慢病毒，腺病毒，腺相关病毒）
●shRNA稳转细胞系筛选
| 基因编辑细胞系构建 | ||
| 基因编辑细胞系构建 | DNA水平基因敲除细胞系构建 | 客户须告知敲除基因信息和细胞系 |
| 基因编辑细胞系构建 | DNA水平基因突变细胞系构建 | 客户须告知需致突变的信息和细胞系 |
| 基因编辑细胞系构建 | DNA水平基因标记细胞系构建 | 客户须告知敲除基因信息和细胞系 |
| 基因编辑细胞系构建 | siRNA/shRNA转染及效果检测 | -- |
| 基因编辑细胞系构建 | shRNA稳转细胞系构建 | -- |
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文献和实验在最新出版（2016.02）的冷泉港实验指南的头版，详细阐述了 CRISPR-Cas9 系统在小鼠基因编辑中应用。 在现代生物学中，实现对小鼠基因进行编辑或许是最重要的进步之一。然而，传统基因工程手段都很费时费力。可编程核酸酶的使用极大的提高了基因编辑技术的准确性（如，锌指核酸酶、转录激活效应核酸酶），但是这些核酸酶的设计和使用仍然纷繁复杂成本高昂。随着下一代可编程核酸酶系列--CRISPR-Cas9 系统的出现，使得基因编辑的能力更加高效准确，与此同时，该系统所涉及的试剂
CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
的序列，CRISPR-Cas9 免疫系统就能够区分出哪些是自身的序列，哪些不是。 DNA 序列上存在 PAM 结构就会被剪切，而 CRISPR 自身基因座上的序列，同样也能被引导 RNA 识别并结合，但因为不存在 PAM 结构，所以不会被 Cas9 蛋白切割。 CRISPR-Cas9 基因编辑系统 简单概括 CRISPR-Cas9 技术，就是 sgRNA 引导序列设计为在目的序列 NGG 结构的上游 20 个碱基的互补序列。同时将 Cas9 蛋白
