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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 库存:
20-60
- 供应商:
上海研生
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
IgHV
- 规格:
0.1ml
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文献和实验关键词: 单链抗体; 重链; 可变区; 反向PCR ; 宫颈癌 单克隆抗体(mAb) V 区cDNA 序列的克隆是构建单链抗体(ScFv) 的关键一步[1 ] 。通常是在抗体V 区序列两头5′和3′端设计带简并碱基的引物, 用普通PCR 法进行扩增[2 ] 。该法虽看似简单, 但局限性很大, 若遇到同源性差且复杂的序列, 则难以获得。同时, 因带有简并碱基, 可使PCR 产物不纯
PCR 扩增模板和抗体可变区基因的扩增 如果构建Fab抗体库,必需利用RT-PCR获取抗体基因;构建ScFv抗体库,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在构建小鼠ScFv抗体库过程中,主要采用DNA作为扩增模板。 【材料和试剂】 (1)PCR仪 (2)Taq酶 (3)氯仿 (4)琼脂糖 【操作步骤】 (1)在200μl离心管中混匀下列成分: 模板
4)和3个CDRs。VH和VI-中的各氨基酸可编号,一些保守的氨基酸都有其固定的编号位置,将不同序列和已编号的序列进行对比以后,在某个位置上多出来氨基酸编号为A、B、C等,如27A、27B、27C、106A等。VH和VL的3个CDR共同组成Ig的抗原结合部位,识别及结合抗原,并决定抗体识别的特异性。 免疫球蛋白轻、重链可变区氨基酸顺序的编号 重链和轻链的C区分别称为CH和CL,不同型别(x或入)CI。的长度基本一致.但不同类别IgCH的长度不一,有的包括CHl~CH3,有的为CHl
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