脱盐高流速琼脂糖凝胶

工艺放大不难！琼脂糖基质填料也可以实现高流速

随着生物技术的不断发展，基因工程表达体系的生产能力大幅度增加，不少基因工程药物的生产规模已达数千甚至万升级发酵罐。细胞表达量可达数g/L甚至10 g/L。种类丰富的高表达量上游产品对下游纯化提出了挑战，尤其是目前的纯化工艺中多采用琼脂糖基质的微球作为层析填料，该基质微球虽生物相容性好，但骨架刚性低，在较高的压力下容易出现变形或者孔道的改变，影响纯化效率。很多企业只能以牺牲高流速的形式来保证纯化效率，无形中拉长了蛋白的纯化时间，使蛋白质变性或者解聚失活的风险增加，也使纯化成本进一步增高

一文搞定纯化实验 7 大常见问题！

，凝胶过滤层析主要可以分为以下三种方法 ： ● 制备级凝胶过滤纯化：对于分辨率有较高的要求： （1）上样体积一般在柱体积的 0.5%～4% ； （2）运行较低的流速 ； （3）使用较高的柱子（一般 ≥ 60 cm）。 经过纯化后的样品将被直接置换到合适的缓冲液条件中，用于后续的实验或储存。 ● 分析型凝胶过滤层析：对于分辨率有很高的要求，上样体积一般在柱体积的 0.3%～0.5% ，使用柱子的高度一般为 30 cm。而在快速纯度检测和筛选实验中，常用的是 15 cm 柱高的柱子，可以在提供足够

天然蛋白纯化思路解析

较高的蛋白首先使用 Capto S 进行阳离子交换粗纯，由于大部分宿主蛋白杂质带负电，会从阳离子柱上流穿，因此 Capto S 可以除掉绝大多数的背景蛋白。 然后使用 Superdex 75 10/300 GL分子筛进行精细纯化，此步可以去聚集体或痕量小分子杂质，至此就可以得到较纯的天然蛋白组分了。   Capto 系列的离子交换和疏水填料都拥有高动态载量，高流速，高化学耐受性的特点，可以在更短的时间完成更高处理量的纯化实验，时间和经济成本都可节省。 相信你已经get 到了天然蛋白纯化的精髓