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20 tests
从细胞和组织中分离细胞质和细胞核组分是一种常见的实验。细胞样品的组分分离相对简单直接,然而,从组织样品中特别是冷冻组织中将胞质和胞核组分分离干净是很具挑战的。因为冷冻和反复冻融会引起组织细胞结构的改变,加之不适当的匀浆方式和效率低的提取缓冲液,使得交叉污染十分严重。目前大多数商业试剂盒设计可同时用于细胞和组织样品,但是忽略了两种类型样品之间的结构差异。因此,从新鲜/冷冻组织中分离胞质和胞核组分时,交叉污染问题无法避免(见下文参考文献1和2)。这款新型的胞质和胞核分离试剂盒专用于组织样品的胞质胞核分离,试剂盒特有的缓冲液体系和独特的操作方法可以将交叉污染降到最低。整个操作可以在30分钟内完成。
应用:
可应用于SDS-PAGE,immunoblottings,ELISA,IP,蛋白定位,凝胶迁移分析,2-D等其他应用。
储存:
常温
中
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文献和实验柱式法 Minute TM 胞质胞核分离试剂盒操作方法:A. 悬浮细胞样品(包括植物,细菌,酵母和真菌制备的原生质体)1.500Xg,3 分钟低速离心收集细胞,用预冷的 PBS 清洗一次2. 将细胞转移到 1.5 ml 离心管中,3000 rpm 离心 1-5 分钟,弃去上清。3. 按表格 1 加入适量的胞浆提取缓冲液(请注意样品及裂解液的比例,以达到最佳效果), 涡旋大力震荡 15 秒, 冰上孵育 5 分钟, 混匀. 接转胞质胞核分离步骤。B. 贴壁细胞1. 贴壁细胞生长至融合度 90
等渗的提取缓冲液(带或不带还原剂和蛋白酶抑制剂)来维持感兴趣的细胞器。有时也需要机械裂解或去污剂裂解。“各个不同供应商在细胞分级分离试剂盒的设计上都是一致的,而不同细胞组分的差异在于缓冲液组成、裂解试剂和离心速度,”Moehlenbrock说。 此类试剂盒的价值并不在于某些秘密试剂,而在于QC系统的一致性和重复性。“细胞分级分离的方法已经过充分鉴定,其操作步骤适用于大部分应用,”Moehlenbrock说。“商业化试剂盒为最终用户带来了简便和效率,同时提供了品质保证的安全
的? Novagen的预制T7Select cDNA文库均以T7Select10-3b制备,材料是经 Novagen的Straight A’s™ mRNA分离试剂盒两次纯化的mRNA。mRNA最长达8 kb以上,经反转录,用Novagen的OrientExpress™ Random Primer cDNA Kit (带甲基化dCTP)克隆。原始库的重组子为>1 x107 pfu,文库的滴度最低为1 x 1010 pfu。所有文库仅经一次包装和扩增。 哪一种Novagen的T7噬菌体载体
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