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图3. HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到红色荧光(最左侧一列);EdU (10μM)孵育2小时组有明亮的红色荧光(中间一列);而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后,红色荧光显著减弱,说明DNA合成抑制后,EdU的掺入被显著抑制(最右侧一列)。
图4. Jurkat细胞用本试剂盒标记后用流式细胞仪检测细胞增殖的效果图。Jurkat细胞只用EdU标记(左图),或在标记的同时用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右图),2小时后用本试剂盒进行点击反应,然后用流式细胞仪进行检测。从图中可以看出,仅EdU标记的细胞有较高比例的红色荧光(555 fluorescence)阳性细胞,呈现红色荧光阴性(弱染色)和阳性(强染色)的两个峰(左图),分别对应于未增殖细胞和增殖细胞。经过羟基脲处理的细胞,红色荧光阳性的细胞几乎完全消失(右图),仅剩下一个红色荧光阴性的峰(右图)。该检测结果说明DNA合成被抑制后,EdU的掺入也被抑制。实测数据可能会因细胞类型、细胞增殖情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本试剂盒小包装C0075S如果用于培养的细胞(6孔板)的检测,可以检测50个样品,每个样品的反应体系为500μl的Click反应液;如果用于96孔板检测,可以检测500个样品,每个样品的检测体系为50μl的Click反应液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板样品的检测,分别可以检测125、250、350和1250个样品,每个样品推荐的Click反应液用量为200μl、100μl、70μl和20μl。小包装如果用于流式细胞仪检测,可以检测50个样品,每个细胞样品的细胞数量宜为10-100万,每个样品的反应体系为500μl的Click反应液。小包装如果用于冰冻或石蜡切片的检测,可以检测125-250个样品, 每个样品的反应体系为100-200μl的Click反应液。大包装C0075L可检测样品的数量为小包装C0075S的4倍。
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