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Genopure质粒中提试剂盒
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Genopure Plasmid Midi Kit
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嵘崴达
1 ISOLATIONS
Genopure质粒中抽试剂盒可从细菌培养液中制备中量级的转染级质粒DNA(最gao100 μg质粒)。分离的质粒适用于绝大多数分子生物学应用:• 转染• Southern blotting• 测序• PCR• 限制性分析• 克隆
Genopure质粒中抽试剂盒使用了改良的碱性裂解法制备中等量的高纯度质粒DNA。• 使用即用型试剂,节省时间。最多可纯化20个样品(10分钟手动操作/总共75分钟)。• 可纯化所有大小和类型的质粒,甚至是BAC DNA,因为可以过滤粗裂解物以避免质粒剪切。• 可并行处理多个样本使用高速重力流动柱。• 无需使用有害的有机化合物如氯化铯、苯酚、氯仿和溴化乙锭。• 所得质粒DNA的纯度高于通过2×氯化铯梯度离心制备的质粒。
• 悬浮缓冲液• RNase A• 裂解缓冲液• 中和缓冲液• 平衡缓冲液• 洗涤缓冲液• 洗脱缓冲液• NucleoBond AX 100色谱柱• 折叠式过滤器(直径150 mm)• 密封圈
已对使用该试剂盒纯化得到的质粒DNA进行了限制性酶切消化测试;根据实验方案所述方法从转化HB101中分离得到pUC 19。如琼脂糖凝胶分析所示,在+ 37℃下使用1单位Msp I将1μg质粒完全酶解2小时。用50μg纯化质粒测试质粒回收率。超螺旋形式大于80%时,回收率高于90%。通过从DH5a细胞中分离pBS,确定质粒DNA的产量。从A600密度为3-6的30 ml培养物中,获得超过85μg的质粒DNA。纯度(利用A260/A280比率进行检测)为1.8±0.2。
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