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- 2025年11月20日
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- 英文名：
RNA Polymerase, T7
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- 供应商：
嵘崴达
- 保存条件：
−20°C
- 规格：
5000 UNITS
T7 RNA 聚合酶
from Escherichia coli BL 21/pAR 1219
别名:
polymerase
一般描述
T7 RNA 聚合酶通常用于转录DNA，这些 DNA 已经克隆到具有两个相反方向的噬菌体启动子的载体中。可以使用不同的聚合酶，从插入 DNA 的任一链，选择性地合成 RNA。使用该系统可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记，或用 [α-32P] 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。
杂交探针的合成：T7 RNA 聚合酶能高效生产均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针，以及原位杂交。
合适的标记：转录物可以用生物素-16-UTP 或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记。它们也可以用 [α-32P]- 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记为高比活性。
特异性
启动子特异性
T7 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性，仅转录噬菌体 T7 DNA 或克隆到T7 启动子下游的 DNA。尽管 T7 和 T3 启动子序列仅相差 3bp，但 T7 RNA 聚合酶仅转录克隆到其启动子下游的DNA。
热灭火：通过加入 2 μl 0.2MEDTA（pH8.0）和/或加热至 65℃ 来终止反应。
应用
- T7 RNA 聚合酶可以转录来自 T7 启动子下游的克隆 DNA 模板的 RNA。可以用标记的 NTP 进行合成以产生高度标记的 RNA。合成的 RNA 有多种应用，包括：RNA 或 DNA 印迹技术
- 原位杂交
- RNA 酶保护研究：由酶合成的转录物可用作 RNA 剪接和加工研究的前体 RNA。
- 通过在转录反应期间加入 m7GpppG 或 m7GpppA 超过 GTP 或 ATP，以在体外合成加帽的 RNA。可以将产生的反义 RNA 引入细胞中，以抑制相应基因的表达。
- 微阵列靶标合成
包装
1个试剂盒包含2个组分
| 10881775001 | RNA Polymerase, T7, 5000 U T7 RNA聚合酶 | 5,000 U |
| 11031171001 | RNA Polymerase, T3, 5000 U T3 RNA聚合酶 | 5,000 U |
| 3353575910 | DIG Oligo 3'-End Lab. Kit,2nd | 1 kit (25 labeling reactions) |
| 10481238001 | pBR322 DNA (1 A260 unit) | 200 µl (1 A260 unit) |
| 11388908910 | Biotin-16-UTP | 250 nmol (25 µl) |
| 11745816910 | DIG-Nick translat.mix f.in sit | 160 µl (for 40 labeling reactions) |
| 11093274910 | Anti-digoxigenin AP-conjungate | 150 U (200 µl) |
| 10885819001 | pUC18 DNA | 50 µg (200 µl) |
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