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T7 RNA聚合酶
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T7 RNA Polymerase
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嵘崴达
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1000 units
T7 RNA 聚合酶通常用于转录DNA,这些 DNA 已经克隆到具有两个相反方向的噬菌体启动子的载体中。可以使用不同的聚合酶,从插入 DNA 的任一链,选择性地合成 RNA。使用该系统可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记,或用 [α-32P] 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。杂交探针的合成:T7 RNA 聚合酶能高效生产均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针,以及原位杂交。合适的标记:转录物可以用生物素-16-UTP 或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记。它们也可以用 [α-32P]- 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记为高比活性。
启动子特异性T7 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性,仅转录噬菌体 T7 DNA 或克隆到T7 启动子下游的 DNA。尽管 T7 和 T3 启动子序列仅相差 3bp,但 T7 RNA 聚合酶仅转录克隆到其启动子下游的DNA。热灭火:通过加入 2 μl 0.2MEDTA(pH8.0)和/或加热至 65℃ 来终止反应。
• T7 RNA 聚合酶可以转录来自 T7 启动子下游的克隆 DNA 模板的 RNA。可以用标记的 NTP 进行合成以产生高度标记的 RNA。 合成的 RNA 有多种应用,包括:RNA 或 DNA 印迹技术• 原位杂交 • RNA 酶保护研究:由酶合成的转录物可用作 RNA 剪接和加工研究的前体 RNA。• 通过在转录反应期间加入 m7GpppG 或 m7GpppA 超过 GTP 或 ATP,以在体外合成加帽的 RNA。可以将产生的反义 RNA 引入细胞中,以抑制相应基因的表达。• 微阵列靶标合成
1个试剂盒包含2个组分
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