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T7 RNA聚合酶

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  • roche
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  • 2025年10月30日
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    • 英文名

      T7 RNA Polymerase

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      嵘崴达

    • 保存条件

      −20°C

    • 规格

      1000 units

    T7 RNA 聚合酶

    T7 RNA Polymerase

    from Escherichia coli BL 21/pAR 1219

    General description

    T7 RNA 聚合酶通常用于转录DNA,这些 DNA 已经克隆到具有两个相反方向的噬菌体启动子的载体中。可以使用不同的聚合酶,从插入 DNA 的任一链,选择性地合成 RNA。使用该系统可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记,或用 [α-32P] 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。

    杂交探针的合成:T7 RNA 聚合酶能高效生产均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针,以及原位杂交。
    合适的标记:转录物可以用生物素-16-UTP 或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记。它们也可以用 [α-32P]- 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记为高比活性。

    Specificity

    启动子特异性
    T7 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性,仅转录噬菌体 T7 DNA 或克隆到T7 启动子下游的 DNA。尽管 T7 和 T3 启动子序列仅相差 3bp,但 T7 RNA 聚合酶仅转录克隆到其启动子下游的DNA。
    热灭火:通过加入 2 μl 0.2MEDTA(pH8.0)和/或加热至 65℃ 来终止反应。

    Application

    • T7 RNA 聚合酶可以转录来自 T7 启动子下游的克隆 DNA 模板的 RNA。可以用标记的 NTP 进行合成以产生高度标记的 RNA。 合成的 RNA 有多种应用,包括:RNA 或 DNA 印迹技术
    原位杂交
    • RNA 酶保护研究:由酶合成的转录物可用作 RNA 剪接和加工研究的前体 RNA。
    • 通过在转录反应期间加入 m7GpppG 或 m7GpppA 超过 GTP 或 ATP,以在体外合成加帽的 RNA。可以将产生的反义 RNA 引入细胞中,以抑制相应基因的表达。
    • 微阵列靶标合成

    包装

    1个试剂盒包含2个组分

    10881767001 RNA Polymerase, T7, 1000 UT7 RNA聚合酶 1,000 U
    11031163001 RNA Polymerase, T3, 1000 U RNA聚合酶T3 1,000 U
    11214667001 Anti-Digoxigenin, Fab Fragment 1 mg
    11449460001 DNA MW-Marker IX 50 µg (1 A260 unit)
    10711454001 BSA, 20mg, SQ for Molecular Bi 20 mg (1 ml)
    4898133001 rAPid Alkaline Phosphatase 100碱性磷酸酶 1,000 reactions
    11759779001 BM Chem-Lum. ELISA Substr. (AP 150 ml
    10909831001 Restr.-Endonucl. Nsi I, 200 u 200 U (10 U/µl)

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    相关实验
    • RNA聚合酶 RNA polymerase

        一般是指 DNA依存性 RNA聚合酶。是催化以 DNA为模板( template)、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成 RNA的酶。因为在细胞内与基因 DNA的遗传信息转录为 RNA有关,所以也称转录酶。反应以下式示:     n1 -n4 表示各个模板的 DNA链的胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘧啶、腺嘌呤的碱基数。通过特异的碱基配对的形成,合成具有与模板 DNA链完全互补的碱基排列的 RNA。反应是由( 1) DNA与酶的结合

    • RNA聚合酶综述

      ,则可计算其直径约为100A,即约为双链DNA的30bp节段的长度。然而全酶可结合约60个核苷酸 ,提示其形状应为椭圆球形。 结构 为什么细菌 的RNA聚合酶需要这么大和复杂的分子结构呢?而某些噬菌体特有的RNA聚合酶则要小得多,仅由一条多肽链组成。这证明RNA合成所需的机构可以远比宿主的酶小。这种情况说明,噬菌体内的转录仅需一条"最小"的机构。然而这种酶只能识别噬菌体本身所有的少数几个启动子;它们不能识别其他启动子。例如噬菌体T3和T7RNA聚合酶分子很相似

    • mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase

      on a 42ºC oven and set PCR machine to hold at 70ºC. In an Eppendorf tube add: 1 µg Total RNA 1 µL T7 oligo(dT) primer q.s. to 12 µL with Nuclease-free H2 O Incubate 10 min. at 70ºC.  Spin briefly to pull

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