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多聚腺苷酸聚合酶(克隆)2 U/μL
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嵘崴达
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80 units
多聚腺苷酸聚合酶(克隆)2 U/μL
货号: AM2030
Ambion™ 多聚腺苷酸聚合酶可以序列无关的方式,催化腺苷添加到 RNA 的 3' 末端。该酶可用于将放射性标记 ATP 加在 RNA 分子的 3' 端,生成标记 RNA。以每管含 80U (2U/µL)、5X 多聚腺苷酸聚合酶缓冲液和 25mM MnCl2 的管装形式提供。该酶可与末端转移酶、逆转录酶和热稳定性聚合酶结合使用,克隆未知序列的 RNA。
上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
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Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
OXOID,BD培养基础货期八周左右,部分现货。
MCE激动剂,ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验来源的模板DNA 。 二、设备:移液器及吸头,硅烷化的PCR 小管,DNA 扩增仪(PE公司),琼脂糖凝胶电泳所需设备(电泳槽及电泳仪),台式高速离心机。 三、试剂: 1、10×PCR 反应缓冲液:500mmol/L KCl, 100mmol/L Tris·Cl, 在25℃下, pH9.0, 1.0% Triton X-100。 2、MgCl2 :25mmol/L。 3、4种dNTP混合物:每种2.5mmol/L。 4、Taq DNA 聚合酶5U/μl。 5、T4 DNA 连接
的一个致命弱点是它的出错率,一般PCR 中出错率为2×10-4 核苷酸/每轮循环,在利用PCR 克隆 和进行序列分析时尤应注意.在100μl PCR 反应中,1.5-2单位的Taq DNA 聚合酶就足以进行30轮循环.所用的酶量可根据DNA 、引物及其它因素的变化进行适当的增减.酶量过多会使产物非特异性增加,过少则使产量降低.反应结束后,如果需要利用这些产物进行下一步实验,需要预先灭活Taq DNA 聚合酶, 灭活Taq DNA 聚合酶的方法有:(1) PCR 产物经酚:氯仿抽提,乙醇
Tris·Cl, 在25℃下, pH9.0, 1.0% Triton X-100。 2、MgCl2 :25mmol/L。 3、4种dNTP混合物:每种2.5mmol/L。 4、Taq DNA聚合酶5U/μl。 5、T4 DNA连接酶及连接缓冲液。 6、经SmaⅠ酶切和加dT的pUC质粒。 7、其它试剂:矿物油(石蜡油),1% 琼脂糖,5×TBE,酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),无水乙醇和70% 乙醇。 操作步骤 一、PCR反应 1、 依次混匀下列试剂 35μl
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