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鹿森生物
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瓶装
一般描述
蛋白质G最初是从G148中分离出来,这是一种人组G链球菌菌株。这是一种细胞壁蛋白,有很高的IgG(免疫球蛋白G)亲和性。它公认的分子量是30000Da。它能和所有人IgG亚型互作,也能够结合小鼠、兔和山羊IgG。[1]
特异性
蛋白质G是一种细胞壁蛋白质,从特殊细菌菌株中分离出来,对于来自不同物种的某些型免疫球蛋白有特异性结合位点。蛋白G几乎能够结合所有IgG亚型,但无法结合其它型免疫球蛋白。
结合能力:20mg人IgG(多克隆)/ml(IgG在pH7.0上样,pH2.8条件下采用20mg甘氨酸洗脱)
结构:重组蛋白G(E.coli,Mr=22000)共价偶联到4%交联琼脂糖珠:2.5mg蛋白质G(>98%纯化)/1ml胶。
应用
亲和层析使用蛋白G琼脂糖,就像蛋白A琼脂糖,是从许多物种中纯化IgG的方法。它可用作
泛素化实验[2][3]
免疫沉淀实验的预清理剂[2][4]
特点和优势
内容物
Preswollen胶,即用型,2ml或5ml胶(固定胶体积),溶于含14-19%乙醇(作为保鲜剂)的缓冲溶液中,未灭菌。
蛋白G内容物:2.5mg/ml preswollen胶
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文献和实验Genetic, biochemical, and molecular characterization of the polypeptide transport-associated domain of Escherichia coli BamA.
Patricia Workman et al.
Journal of bacteriology, 194(13), 3512-3521 (2012-05-01)
离心5分钟1.6.将上清倒去,使用FA裂解液将沉淀重悬浮(1x107cells/750μl).初始细胞要有1*107-5*107个,采用终浓度为0.75%甲醛和如上描述的甘氨酸处理。预冷PBS洗3次,1,000g离心5分钟,沉淀用FA裂解液重悬浮。2 超声破碎超声裂解细胞悬液可以将DNA均一的打断成500-1000bp的片段。不同的细胞系需要不同的超声时间才能达到最优效果。交联细胞要通过时间梯度的超声来选择最优超声条件。样品通过时间梯度,DNA的分离如部分3所描述。片段大小序在1.5%的琼脂糖
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关于牛初乳免疫球蛋白G(IgG)定量检测,国内外主要有:酶联免疫法(ELISA)、琼脂双向或单向免疫扩散法(RID)、免疫电泳法、高压液相色谱法(HPLC)等等。从实践角度考虑,目前单向免疫扩散法(SRID)和高压液相色谱法(HPLC)较为现实。 1、 单向免疫扩散法 辐射状免疫扩散(radial immunodiffusion,简称RID)又称单向琼脂扩散(single agar
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