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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C
- 英文名:
5-Fluoroorotic Acid Monohydrate
- 供应商:
深圳市康初源有限公司
- CAS号:
703-95-7
- 规格:
1g
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文献和实验监测蛋白间的相互作用。例如酵母URA3基因表达产物是尿嘧啶合成所必需的, 同时它又可催化5-氟乳清酸(5-FOA)转化为有毒物质。Vidal等构建了一酵母细胞株, 其URA3的表达由含GAL4结合位点的启动子严密控制。此细胞株在缺乏尿嘧啶的培养基中培育需要GAL4激活结构域(GAD)和GAL4 DNA结合结构域(GBD)的融合蛋白的相互作用的表达。而在含5-FOA的完全培养基中则受GAD和GBD融合蛋白相互作用的抑制。因此可通过筛选5-FOA抗性克隆从随机突变库中鉴定阻断蛋白相互作用的突变体。
了双杂交的筛选效率。在研究蛋白质的结构功能特点、作用方式过程中,有时还要通过突变、加抑制剂等手段破坏蛋白质间的相互作用。针对实际工作中的这种需要,Vidal 等人发展了所谓的逆双杂交系统(reverse two-hybrid system)。这项技术的关键是报道基因URA3 的引入。URA3 基因在这里起到了反选择的作用,它编码的酶是尿嘧啶合成的关键酶。该酶能把5- 氟乳清酸(5-FOA)转化成对细胞有毒的物质。Vidal 等人通过改造在URA3 基因的启动子内引入Gal4 的结合位点。这个改造
方式过程中,有时还要通过突变、加抑制剂等手段破坏蛋白质间的相互作用。针对实际工作中的这种需要,Vidal等人发展了所谓的逆双杂交系统(reverse two-hybrid system)。这项技术的关键是报道基因URA3的引入。URA3基因在这里起到了反选择的作用,它编码的酶是尿嘧啶合成的关键酶。该酶能把5-氟乳清酸(5-FOA)转化成对细胞有毒的物质。Vidal等人通过改造在URA3基因的启动子内引入Gal4的结合位点。这个改造的酵母菌株在缺乏尿嘧啶的选择性培养基上只有当“诱饵”和“猎物”相互
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