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T4连接酶库存

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  • ¥150 - 1610
  • 百奥莱博
  • JN0066-QWJ
  • 北京
  • 2025年07月08日
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      515

    • 英文名

      T4 DNA Ligase

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    T4连接酶库存是高品质的工具酶产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多T4连接酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

    北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应T4连接酶库存,产品信息:

    类别:工具酶

    英文名:T4 DNA Ligase

    产品名 产品编号 包装规格
    T4连接酶 JN0066 28KU

    编号:JN0066

    规格:28KU

    英文名:T4 DNA Ligase

    品牌:百奥莱博

    产地:北京

      T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的连接反应,也能催化双链RNA 5´-磷酸末端和3´-羟基末端间的连接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上反应均需消耗ATP。

     

    产品组成

     

    组份 体积
    T4 DNA连接酶(350U/μl) 80μl
    2×Quick Ligation Buffer 1ml
    10×T4 DNA Ligation Buffer 1ml

     

    产品特点

    随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择:而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃过夜连接可获得最高的连接效率;使用快连Buffer在室温(25℃)下,仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接反应。

     

    产品用途

    1、DNA片段和载体DNA的连接。(参见实验方案)。

    2、DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。

     

    使用建议

    1、粘末端的连接反应:插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要,此比例在2-6之间最好,低于2:1就会导致较低的连接效率,高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。

    2、平滑末端的连接反应:平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时,可提高DNA浓度,将使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。

    3、向粘粒或噬菌体进行连接反应:可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1,同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)

    4、反应温度:该酶的最适温度为37℃,由于热稳定性较差,因此长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室温下进行反应。

    5、抑制剂:T4 DNA连接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用,最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。

     

    应用实例

    T4 DNA连接酶

    图例1 )在25℃,用不同活性单位(2U、4U、6U)T4 DNA连接酶与λDNA/Hind III片段作用10分钟后的结果以及连接产物灭活T4连接酶后再次使用Hind III酶切结果。

    泳道1:λDNA/Hind III;

    泳道2:λDNA/Hind III+2U T4 Ligase;

    泳道3:λDNA/Hind III+4U T4 Ligase;

    泳道4:λDNA/Hind III+6U T4 Ligase;

    泳道5:λDNA/Hind III ,T4 Ligase连接产物,Hind III酶切

     

    活性定义:在20μl的连接反应体系中, 6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个单位。

     

    质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

     

    快速连接步骤:

    1、取50ng载体和3倍摩尔量的插入片段,用双蒸水调整总体积为10μl。

    2、加入10μl 2×Quick Ligation Buffer,混匀。

    3、加入0.5~1μl T4 DNA连接酶,充分但轻柔混匀(切勿剧烈震荡,可能导致酶部分失活)。

    4、稍事离心,置于室温(25℃)作用5分钟。

    5、冰上放置,转化(如不立即进行转化实验请冻存于-20℃)

    T4连接酶库存专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司

    关键词:T4连接酶,JN0066,T4 DNA Ligase

    T4连接酶的不同等级:

    除了优级纯、分析纯、化学纯、实验试剂外,目前市场上尚有:基准试剂(PT):专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。光谱纯试剂(SP):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%)。

    一般化学试剂的品级:一级试剂、二级试剂、三级试剂、四级试剂

    国内标准名称:优级纯(保证试剂)、分析纯、化学纯 、实验试剂

    国内标签颜色:绿色、红色、蓝色、中黄色

    想要了解更多关于T4连接酶库存的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:

    编号 类别 名称
    JN0836 重组蛋白 重组人NLGN4X(神经连接蛋白4X)
    JN1766 重组蛋白 重组人羧肽酶E(CPE)
    JN1796 重组蛋白 重组人SPINK7(丝*酸蛋白酶抑制剂Kazal 7型)
    JN0937 重组蛋白 重组人碳酸酐酶3(CA3)
    JN0496 重组蛋白 重组人LIGHT(TNFSF14)
    JN1257 重组蛋白 重组人SEPHS1
    JN1964 重组蛋白 重组人泛素结合酶E2-H(UBCE2H)
    JN0585 重组蛋白 重组人胰凝乳蛋白酶B(CTRB1)
    JN0036 核酸扩增(PCR) 2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix
    JN0358 重组蛋白 重组人白介素1受体辅助蛋白(IL-1RAcP)
    JN1450 重组蛋白 重组小鼠Ephrin-A3(EphA3)
    JN0315 重组蛋白 重组小鼠趋化因子CXCL16(SR-PSOX)
    JN0525 重组蛋白 重组人FAM3D蛋白
    JN0457 重组蛋白 重组人肿瘤坏死因子受体超家族成员12A(TNFRSF12A)
    JN1959 重组蛋白 重组人微管相关蛋白Tau-D(MAPT)
    JN1403 重组蛋白 重组小鼠IL-2 RA
    JN0462 重组蛋白 重组小鼠TWEAKR(TNFRSF12)
    JN1658 重组蛋白 重组人FBPase1
    JN0892 重组蛋白 重组人死亡因子4样蛋白2(MORF4L2)
    JN1402 重组蛋白 重组人IL-17B
    JN1349 重组蛋白 重组人ACY3
    JN1010 重组蛋白 重组人AREG(双调蛋白)(双向调节蛋白)(双向调节因子)
    JN1409 重组蛋白 重组小鼠血清淀粉样蛋白P成分(PTX2)(SAP)
    JN0611 重组蛋白 重组人丛状蛋白结构域1(PLXDC1)
    JN0270 重组蛋白 重组人成纤维细胞生长因子8F(FGF-8F)
    JN0533 重组蛋白 重组人迁移率族蛋白B1(HMGB1)
    JN0915 重组蛋白 重组人PLA2G16(磷脂酶A2-XVI)
    JN1302 重组蛋白 重组人PRKAR1A(cAMP依赖性蛋白激酶调节亚基1α)
    JN0931 重组蛋白 重组人膜联蛋白10(ANXA10)

     

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    • NEB T4连接酶使用说明

      介绍: Catalyzestheformationofaphosphodiesterbondbetweenjuxtaposed5'phosphateand3'hydroxylterminiinduplexDNAorRNA.

    • T4连接酶实现10分钟快速TA克隆的新方法

      目前市场上常见的TA克隆试剂盒,根据连接方法可以分成两种:方法1:以T4连接酶进行连接的方法,这两种方法转化子比较多,阳性率也不错,唯一的不足就是连接的时间长。因为连接时间越长效率越高,一般快速连接方法需要半个小时到一个小时;达到最佳的效果,要过夜连接。方法2:以拓扑异构(TOPO)进行连接的方法,这种方法的优势是快速连接,在5-15分钟就可以将目的基因克隆到载体中,阳性率比较高,这种方法国内也有人模仿。这种方法虽然速度快,但是也有一些缺陷,比如长片段连接效率不如T4连接酶,转化子少

    • PCR产物克隆(10)

      3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度克隆)。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit)Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T4连接酶

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