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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
515
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
T4连接酶库存是高品质的工具酶产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多T4连接酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应T4连接酶库存,产品信息:
类别:工具酶
英文名:T4 DNA Ligase
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| T4连接酶 | JN0066 | 28KU |
编号:JN0066
规格:28KU
英文名:T4 DNA Ligase
品牌:百奥莱博
产地:北京
T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的连接反应,也能催化双链RNA 5´-磷酸末端和3´-羟基末端间的连接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上反应均需消耗ATP。
产品组成:
| 组份 | 体积 |
| T4 DNA连接酶(350U/μl) | 80μl |
| 2×Quick Ligation Buffer | 1ml |
| 10×T4 DNA Ligation Buffer | 1ml |
产品特点:
随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择:而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃过夜连接可获得最高的连接效率;使用快连Buffer在室温(25℃)下,仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接反应。
产品用途:
1、DNA片段和载体DNA的连接。(参见实验方案)。
2、DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。
使用建议:
1、粘末端的连接反应:插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要,此比例在2-6之间最好,低于2:1就会导致较低的连接效率,高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
2、平滑末端的连接反应:平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时,可提高DNA浓度,将使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。
3、向粘粒或噬菌体进行连接反应:可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1,同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)
4、反应温度:该酶的最适温度为37℃,由于热稳定性较差,因此长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室温下进行反应。
5、抑制剂:T4 DNA连接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用,最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。
应用实例:

图例1 )在25℃,用不同活性单位(2U、4U、6U)T4 DNA连接酶与λDNA/Hind III片段作用10分钟后的结果以及连接产物灭活T4连接酶后再次使用Hind III酶切结果。
泳道1:λDNA/Hind III;
泳道2:λDNA/Hind III+2U T4 Ligase;
泳道3:λDNA/Hind III+4U T4 Ligase;
泳道4:λDNA/Hind III+6U T4 Ligase;
泳道5:λDNA/Hind III ,T4 Ligase连接产物,Hind III酶切
活性定义:在20μl的连接反应体系中, 6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个单位。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
快速连接步骤:
1、取50ng载体和3倍摩尔量的插入片段,用双蒸水调整总体积为10μl。
2、加入10μl 2×Quick Ligation Buffer,混匀。
3、加入0.5~1μl T4 DNA连接酶,充分但轻柔混匀(切勿剧烈震荡,可能导致酶部分失活)。
4、稍事离心,置于室温(25℃)作用5分钟。
5、冰上放置,转化(如不立即进行转化实验请冻存于-20℃)
T4连接酶库存专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:T4连接酶,JN0066,T4 DNA Ligase
T4连接酶的不同等级:
除了优级纯、分析纯、化学纯、实验试剂外,目前市场上尚有:基准试剂(PT):专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。光谱纯试剂(SP):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%)。
一般化学试剂的品级:一级试剂、二级试剂、三级试剂、四级试剂
国内标准名称:优级纯(保证试剂)、分析纯、化学纯 、实验试剂
国内标签颜色:绿色、红色、蓝色、中黄色
想要了解更多关于T4连接酶库存的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
| 编号 | 类别 | 名称 |
| JN0836 | 重组蛋白 | 重组人NLGN4X(神经连接蛋白4X) |
| JN1766 | 重组蛋白 | 重组人羧肽酶E(CPE) |
| JN1796 | 重组蛋白 | 重组人SPINK7(丝*酸蛋白酶抑制剂Kazal 7型) |
| JN0937 | 重组蛋白 | 重组人碳酸酐酶3(CA3) |
| JN0496 | 重组蛋白 | 重组人LIGHT(TNFSF14) |
| JN1257 | 重组蛋白 | 重组人SEPHS1 |
| JN1964 | 重组蛋白 | 重组人泛素结合酶E2-H(UBCE2H) |
| JN0585 | 重组蛋白 | 重组人胰凝乳蛋白酶B(CTRB1) |
| JN0036 | 核酸扩增(PCR) | 2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix |
| JN0358 | 重组蛋白 | 重组人白介素1受体辅助蛋白(IL-1RAcP) |
| JN1450 | 重组蛋白 | 重组小鼠Ephrin-A3(EphA3) |
| JN0315 | 重组蛋白 | 重组小鼠趋化因子CXCL16(SR-PSOX) |
| JN0525 | 重组蛋白 | 重组人FAM3D蛋白 |
| JN0457 | 重组蛋白 | 重组人肿瘤坏死因子受体超家族成员12A(TNFRSF12A) |
| JN1959 | 重组蛋白 | 重组人微管相关蛋白Tau-D(MAPT) |
| JN1403 | 重组蛋白 | 重组小鼠IL-2 RA |
| JN0462 | 重组蛋白 | 重组小鼠TWEAKR(TNFRSF12) |
| JN1658 | 重组蛋白 | 重组人FBPase1 |
| JN0892 | 重组蛋白 | 重组人死亡因子4样蛋白2(MORF4L2) |
| JN1402 | 重组蛋白 | 重组人IL-17B |
| JN1349 | 重组蛋白 | 重组人ACY3 |
| JN1010 | 重组蛋白 | 重组人AREG(双调蛋白)(双向调节蛋白)(双向调节因子) |
| JN1409 | 重组蛋白 | 重组小鼠血清淀粉样蛋白P成分(PTX2)(SAP) |
| JN0611 | 重组蛋白 | 重组人丛状蛋白结构域1(PLXDC1) |
| JN0270 | 重组蛋白 | 重组人成纤维细胞生长因子8F(FGF-8F) |
| JN0533 | 重组蛋白 | 重组人迁移率族蛋白B1(HMGB1) |
| JN0915 | 重组蛋白 | 重组人PLA2G16(磷脂酶A2-XVI) |
| JN1302 | 重组蛋白 | 重组人PRKAR1A(cAMP依赖性蛋白激酶调节亚基1α) |
| JN0931 | 重组蛋白 | 重组人膜联蛋白10(ANXA10) |
北京百莱博科技有限公司是工具酶产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购T4连接酶库存。
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文献和实验介绍: Catalyzestheformationofaphosphodiesterbondbetweenjuxtaposed5'phosphateand3'hydroxylterminiinduplexDNAorRNA.
目前市场上常见的TA克隆试剂盒,根据连接方法可以分成两种:方法1:以T4连接酶进行连接的方法,这两种方法转化子比较多,阳性率也不错,唯一的不足就是连接的时间长。因为连接时间越长效率越高,一般快速连接方法需要半个小时到一个小时;达到最佳的效果,要过夜连接。方法2:以拓扑异构酶(TOPO)进行连接的方法,这种方法的优势是快速连接,在5-15分钟就可以将目的基因克隆到载体中,阳性率比较高,这种方法国内也有人模仿。这种方法虽然速度快,但是也有一些缺陷,比如长片段连接效率不如T4连接酶,转化子少
3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆)。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit)Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T4连接酶
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