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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括UDG酶 核酸扩增(PCR)在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:UDG酶 核酸扩增(PCR)
编号:JN0059
规格:200U
品牌:百奥莱博
产地:北京
UDG酶分子量25KDa,能特异性识别DNA单链或双链中的尿嘧啶残基,并从DNA上水解去除尿嘧啶残基,防止DNA发生突变,是碱基切除修复过程中的重要组分,对RNA无活性。
产品用途:
UDG酶常被用于消除PCR扩增中的残余污染。在PCR反应液配制时,将dUTP和dTTP按一定的比例混用,使得扩增产物都含有脱氧尿嘧啶。在进行PCR扩增前,在PCR混合液添加UDG酶,并增加2分钟37℃~50℃的保温步骤即可消除以往PCR产物的残留污染,由于UDG在PCR循环中的94℃dU的PCR产物。
使用建议:
UDG酶在Taq酶反应缓冲液中同样具有活性。在PCR反应液中直接添加UDG酶即可,推荐用量为0.2U每50μl体系,在PCR循环程序前增加2分钟37℃ ~50℃保温及可完全消除多达1ng含UTP模板的污染。
应用示例:
UDG酶特异性降解含UTP的DNA模板
反应体系:
| 加入物 | 加入量 |
| 2×Taq MasterMix | 25μl |
| 500bp模板(含UTP) | 1ng |
| 500bp扩增引物对 | 终浓度0.2μM |
| 250bp模板(无UTP掺入) | 1ng |
| 250bp扩增引物对2 | 终浓度0.2μM |
| dH2O | 至50μl |
对照组未添加UDG酶,实验组每50μl反应体系中添加0.2U UDG酶。
PCR循环程序:
| 50℃ | 2分钟(降解含UTP的污染模板) |
| 94℃ | 4分钟(灭活UDG酶) |
| 30次循环 | 94℃,30秒 57℃,30秒 72℃,30秒 |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
图例1)结果显示:UDG酶能特异性降解含UTP的DNA模板并阻止其PCR扩增,且不影响正常模板的PCR扩增反应。
泳道M:DL2000泳道1,2:对照组,未添加UDG酶
泳道3,4:实验组,0.2U UDG酶处理
活性定义:60分钟内催化1nmol尿嘧啶从含尿嘧啶双链DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。
常用PCR残余污染消除体系:
| 加入物 | 加入量 |
| 5×Taq Buffer with Mg2+ | 10μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM (终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM (终浓度) |
| dATP, dGTP, dCTP | 各0.2mM(终浓度) |
| dTTP | 0.1mM(终浓度) |
| dUTP | 0.2mM(终浓度) |
| 如全部使用dUTP替代dTTP | 0.4mM(终浓度) |
| 模板 | 1-50ng(质粒) |
| 10ng-1μg(基因组) | |
| Taq | 0.25μl(1.25U ) |
| ddH2O | 至50μl |
| UDG酶 | 0.2U,如残余污染严重可适量增加酶用量 |
更多有关UDG酶 核酸扩增(PCR)的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·重组人骨硬化蛋白(Sclerostin)(SOST)
编号:JN1141
英文名称:Recombinant Human Sclerostin
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成,目的基因编码的Gln24-Tyr213在C端含有His标签。
SOST质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
SOST制剂:冻干品
SOST保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
SOST复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于SOST:
Sclerostin, also known as SOST, is a member of the Cerberus/DAN family of BMP antagonists. SOST is asecreted glycoprotein with a C-terminal cysteine knot-like (CTCK) domain. It shows sequence similarity to the DAN (differential screening-selected gene aberrative in neuroblastoma) family of bone morphogenetic protein (BMP) antagonists. SOST is produced by the osteocyte and has anti-anabolic effects on bone formation. It is a negative regulator of bone growth that acts through inhibition of Wnt signaling and bone formation.
UDG酶 核酸扩增(PCR)关键词:UDG酶,百奥莱博,JN0059
·重组人CD14
编号:JN1809
英文名称:Recombinant Human CD14
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成,目的基因编码的Thr20-Cys352在C端含有His标签。
CD14质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
CD14制剂:冻干品
CD14保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
CD14复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于CD14:
CD14 is a cell surface glycoprotein that is preferentially expressed on monocytes/macrophages. CD14 is anchored to cells by linkage to glycosylphosphatidylinositol (GPI) and functions as a pattern recognition receptor that binds lipopolysaccharides (LPS) and a variety of ligands derived from different microbial sources. The binding of CD14 with LPS is catalyzed by LPS binding protein (LBP). Toll like receptors have also been implicated in the transduction of CD14-LPS signals. Soluble CD14 can be released from the cell surface by phosphatidyinositolspecific phospholipase C and has been detected in serum and body fluids. High concentrations of soluble CD14 have been shown to inhibit LPS mediated responses. However, soluble CD14 can also potentiate LPS response in cells that do not express cell surface CD14.
UDG酶 核酸扩增(PCR)关键词:UDG酶,百奥莱博,JN0059
BTN80905 大提柱式细菌RNA提取试剂盒 Bacterial RNA Column large-scale extraction kit
WE0156 BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料) BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(High ROX)
SV0468 MfeI-HF限制性内切酶 MfeI-HF Restriction Endonuclease
SV1632 SNAP-Surface Alexa Fluor 546
BTN131005 cDNA第二链合成试剂盒 Second Strand cDNA Synthesis Kit
YT166 甲基绿染色液 Methyl Green Staining Solution
SV1334 E coli RNA 聚合酶, 全酶
HR0347 封闭液(Western) Western blocking buffer
BTN100823 SOC培养基 Super Optimal Broth with Catabolic Repressor,Powder
YT578 头孢菌素C脱乙酰酶 Cephalosporin-C Deacetylase (Crude Enzyme)
SY0444 红色荧光标记人源高密度脂蛋白 Human DiI-High Density Lipoprotein, (Human DiI-HDL)
KFS206 Caspase 9分光光度法检测试剂盒 Caspase-9 Colorimetric Assay Kit
RFT082 BCIP/NBT即用型显色液 BCIP/NBT Solution,Premixed
SY0231 SRE-GFP报告基因质粒 SRE GFP Reporter Plasmid
BTN130992 柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法) Yeast DNA Column extraction kit(Glass bead method)
WE0260 组织蛋白抽提试剂盒 Tissue Protein Extraction Kit
我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购UDG酶 核酸扩增(PCR)。
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文献和实验主要内容:背景PCR引物设计原则常用PCR引物设计软件Primer Premier 5.0 介绍Oligo 6.22 介绍在线Primer3 介绍一、PCR聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量
核酸提取 试剂 核酸扩增或转录——核酸扩增 试剂 产物检测试剂(有些使用全自动分析仪的PCR方法因其核酸扩增和检测同时完成,故无专门的产物检测试剂) 寡核苷酸引物和探针 缓冲液和dNTP 聚合酶 、逆转录酶等 更多详细内容: 马上下载
多重PCR的一些体会这些年一直做一些多重PCR,对多重PCR,有一些自己的小体会,现写出来与大家一道共享并期待与大家的交流。实际求是的说,高通量核酸扩增技术一直是大规模核酸样品检测分析的瓶颈。现在的样品检测比如基于生物芯片平台的核酸样品检测,都是基于同时对成百上千个样品、上百上千个靶基因位点进行,很不幸的是,现有的核酸扩增技术,当然主要是PCR技术,现有的多重PCR是远远不能满足需求的。因此,现在又很多人都在致力于新型高通量核酸扩增技术的开发,这类方法往往采用了固相
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