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- 百奥莱博
- 北京
- SY0293-UOM
- 2025年07月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
- 库存：
820
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
SY0293型逆转录酶北京厂家现货的品牌：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多逆转录酶等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称：逆转录酶
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
本品适用于第一链cDNA合成，cDNA 片段长度最高可达12kb。也可用于低拷贝基因的检测。野生型的M-MuLV包含RNase H活性，该活性可催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因而在cDNA 第一条链的合成过程中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA，本品为通过基因重组技术得到的点突变型RNase H活性缺失的逆转录酶，即M-MLV (H-) Reverse Transcriptase，与M-MuLV相比，不仅改善了模板RNA可能被降解情况，且具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。
注意事项
1）为保证反转录成功，建议使用高质量的RNA样品。
2）请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。
3）如果RNA模板GC含量丰富或者具有复杂的二级结构，可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀，65℃变性5min，冰上冷却，短暂离心后加入其他成分继续下面的反转录步骤。
4）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用方法
1第一条链cDNA合成（以20μl反应体系为例）
1.1 按照表【1】配制反应体系
| RNase free ddH2O | to 20μl |
| 5×Reaction Buffer | 4 μl |
| dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
| Oligo(dT)18(0.5μg/μl) | |
| or Random hexamer (0.1μg/μl) | |
| or GSP(Gene Speicific Primer)(2 μM) | 1 μl |
| RNase inhibitor (40 U/μl) | 0.5 μl |
| M-MLV (H-) Reverse Transcriptase | 1 μl |
| 模板RNA | Total RNA: 50ng-5μg mRNA: 5-500ng |
| 表1 cDNA第一条链合成反应体系表 | |
1.2 轻轻混匀
若使用Oligo(dT)18或基因特异性引物，42℃孵育50min。
若使用Random hexamer，25℃孵育10min，42℃孵育50min。
1.3 65℃加热15min失活M-MLV (H-) Reverse Transcriptase。
2 RT-PCR
建议取1/10～1/5体积（2～4µl）的反转录产物作为PCR模板。
2.1 按照【表2】配制反应体系表
组分体积终浓度
| cDNA模板 | 2μl | 依需要调整 |
| Forward Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| Reverse Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| 10×Taq Buffer(含Mg2+) | 5 μl | 1× |
| 2.5mM dNTPs | 4μl | 0.2 mM |
| Taq DNA Polymerase | 0.5μl | 2.5units |
| ddH2O to final volume | 50μl | / |
| 表2 RT-PCR反应体系表 | ||
2.2 按下列条件进行PCR反应：
储存条件：-20℃。
关键词：逆转录酶,SY0293,M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
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| 编号 | 名称 |
| SY0613 | 重组人IFN-β1b |
| SY0122 | C-REL-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0041 | 脱氧腺苷三磷酸溶液(100 mM)(dATP) |
| SY0547 | 支原体去除试剂(1000×) |
| SY0039 | 2×即用型PCR预混溶液(热启动高保真) |
| SY0591 | 内质网红色荧光探针(活细胞) |
| SY0020 | 定点突变试剂盒 |
| SY0354 | 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液，pH8.8 |
| SY0212 | Elk1-GFP报告基因质粒 |
| SY0266 | RNase抑制剂(鼠源) |
| SY0260 | 双链DNA定量检测试剂盒 |
| SY0175 | GRE-GFP报告基因质粒 |
| SY0254 | 2×RNA上样缓冲液(不含溴化乙锭) |
| SY0146 | STAT3-Luc 报告基因慢病毒颗粒 |
| SY0259 | 双链DNA(dsDNA)定量试剂 |
| SY0086 | ER-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0397 | GST标签蛋白纯化预装柱 |
| SY0362 | 丙烯酰胺 |
| SY0228 | RXR-GFP报告基因质粒 |
| SY0107 | PU.1-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0194 | TCF/LEF1-GFP报告基因质粒 |
| SY0198 | E2F-GFP报告基因质粒 |
| SY0151 | 慢病毒报告基因阴性对照 |
| SY0731 | DyLight 405标记驴抗山羊IgG(H+L) |
| SY0627 | rac-GR24 独脚金内酯 |
| SY0640 | HRP标记小鼠抗β-Tubulin单克隆抗体 |
| SY0163 | PPARγ-GFP报告基因质粒 |
| SY0190 | Oct4-GFP报告基因质粒 |
| SY0336 | 脱氧胆酸钠 |
| SY0639 | 兔抗β-Tubulin多克隆抗体 |
| SY0196 | Myc-GFP报告基因质粒 |
| SY0650 | 小鼠抗Myc-tag单克隆抗体 |
| SY0533 | 淋巴细胞分离液1.084 |
| SY0677 | Alexa Fluor 680标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| SY0442 | 人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白 |
| SY0676 | R-藻红蛋白标记山羊抗兔IgG(H+L)F(ab)2片段 |
| SY0501 | Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒 |
| SY0221 | MEF3-GFP报告基因质粒 |
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，成为迅速崛起的佼佼者。Novagen： 该公司在蛋白表达和纯化工具的研究上成绩卓著，发展了相对应的表达载体和纯化方法，使得用户可以很方便地将蛋白表达、纯化、检测在有协调性的Novagen技术系统内完成。此外还提供蛋白质分子量marker。QIAGEN：德国著名的试剂公司，该公司的核酸分离纯化系列基于多项专利技术，纯度高，产量高，快速方便，品种齐全，为世界知名品牌。其大多数产品以即用型试剂盒形式提供，随产品有非常详细的操作技术手册。此外，还提供优质的传染系统，RT/PCR反应系统（包括高特异性的逆转录酶
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