免疫组化笔优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")免疫组化笔优惠，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：免疫组化笔优惠
编号：ZN1958
规格：1支
品牌：百奥莱博
产地：北京
产品规格：笔液容量：3ml、笔体长度：136mm、笔体宽度：11mm、笔尖2mm、笔体重量：9克、画圈次数：一般正确用法下：1000次以上
应用范围：免疫组化染色、免疫荧光染色、原位杂交、特殊染色等实验。
使用方法：先将组织切片脱蜡水化，然后用薄纸抹去在玻片上的组织边缘的液体，再用免疫组化笔在玻片上被检体周围画圈或在组织边缘上下各画一条线，干燥10-15秒，之后将玻片浸在PBS。
耐热性能：试验过程中的耐热性为120摄氏度以下。
防水性能：优秀。
产品特征：画圈快捷、笔液输出均衡、玻片不易污染、标本制作简单抗体、试剂等在被画圈内不易流失。可在不影响实验结果的前提下有效减少抗原抗体的使用量，并避免表面试剂流失造成的干片、脱片。笔液内物质不溶解在酒精和丙*(代"酮")里，但可被二甲*去除。

免疫组化笔优惠极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·resistin mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN1222
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：rat
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液2ml；
3.resistin mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml；
4.封闭液5ml；
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
resistin的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


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GL0797 苏丹Ⅳ染色液 3×50ml
GL1897 植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) 50T|100T
SK086 半胱*酸含量检测试剂盒 Cys Test Kit
GL0969 碱性品红乙醇溶液(5%) 100ml
GL0513 过氧化物酶染色液(联*(代"*")*(代"胺")法) 4×10ml|4×20ml
GL1655 Tris*盐缓冲液(1×,pH7.8) 500ml
SNM476 DAB显色试剂盒(黄) DAB chromogenic kit
SNM159 组织中的铁含量测定试剂盒(比色法) tissue iron assay kit
GL0245 HEPES-CHAPS缓冲液(pH7.05) 100ml
GL1392 Tris-甘油加样缓冲液(5×) 5ml
SNM275 甘*酰脯*酸二肽*基肽酶测定试剂盒(连续监测法) Glycyl proline dipeptidyl aminopeptidase Assay Kit
GL2056 乳酸脱*酶(LDH)检测试剂盒(二硝基*(代"*")肼微板法) 50T|100T
SK229 土壤全铁检测试剂盒 Soil total iron test kit
GL1154 MOPS电泳缓冲粉剂(1×) 1L|10×1L
SNM074 脂褐质测定试剂盒(荧光比色法) Lipofuscin (LF) measurement kit
GL1832 红细胞渗透脆性检测试剂盒(过筛法) 2×100ml
SK026 氧化型谷胱甘肽含量检测试剂盒 GSSG Test Kit
GL0888 草酸铵结晶紫染色液 100ml
GL0430 Masson三色染色液 7×50ml|7×100ml
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GL0608 过碘酸溶液 0.5%|1% 100ml
GL0155 TB固体培养基粉剂(Terrific Broth) 1L
GL1315 EDTA溶液(0.5mol/L,pH8.0,RNase free) 100ml|500ml
SNM216 总胆汁酸试剂盒(微板法) Total bile acid (TBA) kits
GL0314 DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂) 10ml
SK170 β-半乳糖苷酶检测试剂盒 β-GAL Test Kit
GL1079 聚乙*(代"烯")醇甘油封片剂 5ml|10ml
SNM014 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) Total antioxidant capacity assay kit （FRAP method）
GL1753 乙酸*溶液(3mol/L,pH5.2,无菌) 100ml|500ml
SNM559 DMEM高糖培养基(含L谷*酰胺，不含丙*(代"酮")酸*) DMEM high glucose medium
GL0794 神经HRP示踪显色液(TMB法) 50T
GL1894 人尿微量白蛋白(m-Alb)检测试剂盒(透射比浊法) 50T
|500ml

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