小鼠IL4重组蛋白北京现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括小鼠IL4重组蛋白北京现货促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：小鼠IL4重组蛋白北京现货促销
编号：ZN1772
规格：100ng
品牌：百奥莱博
产地：北京
来源：大肠杆菌
特异性：小鼠
应用：WB阳性对照
形态：冻干粉
纯度：>98%，RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件：-20℃保存1年以上，避免反复冻融。

小鼠IL4重组蛋白北京现货促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·DVL1 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0423
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：human,rat,mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液2ml；
3.DVL1 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml；
4.封闭液5ml；
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
DVL1的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


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SY0056 NTP套装(100 mM each) NTP Set (ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each)
HR0294 磷酸酶抑制剂混合物  Phosphatase inhibitor mixture
BTN131105B 酪蛋白溶液(PBS) Casein Blocking Solution(PBS)
SV0266 BstXI限制性内切酶 BstXI Restriction Endonuclease
SY0418 DEAE弱阴离子高速交换树脂 DEAE Agarose Resin 6FF
KFS179 异硫*酸荧光素 FITC
RFT153 GelHong红色核酸凝胶染料 GelHong Red nucleic acid gel dye
SV1128 T7 核酸内切酶 I T7 nucleic acid enzyme I
BTN71206 柱式动物DNA提取试剂盒 Animal DNA column extraction kit
WE0233 DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台) NGS Library Quantification Kit for Ion torrent 
YT465 C端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白) C-DsRed plasmid（with CMV promoter）
ALH144 植物基因组DNA快速提取试剂盒(CTAB法) Plant genomic DNA Extraction Kit(CTAB)
BTN160901 大肠杆菌DH10B电击感受态细胞 E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell
YT245 生物素标记PPAR凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled PPAR Probe For EMSA
SY0160 RAR-GFP报告基因质粒 RAR GFP Reporter Plasmid
HR0467 Cycloheximide  Cycloheximide
BTN131180 通用酶缓冲液 Universal Enzyme Buffer
YT898 碘化丙啶 Propidium Iodide
SY0518 植物血凝素 Phytohaemagglutinin M(PHA-M)
KFS282 U0126(MEK1/2抑制剂) U0126
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BTN101222 DNA碱性胶上样液 DNAload for Alkaline Gel
WE0400 口腔拭子DNA样本保存管 Swab DNA Storage Tube
SV0930 PicoPLEX 全基因组扩增试剂盒
HR0009 磷酸化蛋白提取试剂盒 Phosphorylated protein extraction kit
BTN100929 细菌膜蛋白质微量提取试剂盒 Bacterial Membrane Protein Miniprep Kit
YT350 磷酸酯酶抑制剂(Sodium orthovanadate)(正钒酸*) phosphatase Inhibitor
SV1610 纯化的 SNAP-tag 蛋白
KFS037 Cy3标记抗山羊免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorescence Staining Kit with Cy3-Labeled Donkey Anti-Goat IgG
BTN131092 生物素 Biotin
SY0061 STAT3萤火虫荧光素酶报告基因质粒 STAT3 luciferase reporter plasmid 
SY0630 1-*乙酸(α-*乙酸) 1-Naphthylacetic acid
KFS383 一氧化*(代"氮")检测试剂盒(化学法测NO2-)
SV0278 BtgZI限制性内切酶 BtgZI Restriction Endonuclease
SY0423 c-Myc Tag多肽 c-Myc Tag Peptide
BTN100812 BLOTTO溶液 BLOTTO Solution
YT102 Alexa Fluor 350抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 350-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
SV1138 SET8 甲基转移酶 SET8 methyl transferase
BTN81101 柱式昆虫DNA提取试剂盒 Insect DNA column extraction kit
BTN100830 低pH缓冲液套装 Low pH Buffer Set
YT470 C端HA标签融合蛋白质粒 C-HA plasmid（with CMV promoter）
ALH154 酵母DNA提取试剂盒 Yeast DNA Extraction Kit
KFS139 —硫代黄素T(ThT) 碱性黄(β-淀粉样蛋白染料)

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