北京CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒价格在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒价格
编号：ZN0288
规格：100T
品牌：百奥莱博
产地：北京
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：human,rat,mouse,rabbit
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液2ml；
3.CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml；
4.封闭液5ml；
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
CHRM1的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

除北京CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒价格外，我公司正在打折促销以下产品：
BTN101201 10%SDS溶液(DNA级)
SY0114 pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照 pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control
HR0390 蛋白离心柱 Protein centrifugal column
WE0142 快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料) BaFaSYBR Mixture(Low ROX)
SV0433 Hpy188III限制性内切酶 Hpy188III Restriction Endonuclease
SY0475 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC) TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
BTN70902 5M甜菜碱溶液，PCR级 Betaine Solution, PCR Grade
YT151 Bcl-2抗体 anti-Bcl-2 antibody
SV1308 pBR322 DNA-BstNI 消化
BTN80912 大提柱式质粒DNA提取试剂盒 Mass-plasmid DNA column extraction kit
BTN111007 MALDI蛋白样品处理试剂盒 MS Sample Preparation Kit
YT564 S-ω转*酶 ω-Transaminase(S-amine) (Crude Enzyme)
ALH260 耐热M-MuLV反转录酶 Thermostable M-MuLV reverse transcriptase
北京CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒价格关键词：CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒,ZN0288,百奥莱博


·EDTA抗原修复液(10×)
编号：ZN1951
规格：100ml
规格说明：一个包装的本产品可以配制成1000毫升抗原修复液(1×)。按照每张标本需10ml抗原修复液(1×)计算，一个包装的本产品约可用于100个样品。
产品用途：本产品特别适合用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。
保存条件：4℃或-20℃保存，一年有效
产品简介：
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。因此，对于石蜡切片，要求在进行IHC染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。EDTA缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC抗原修复液。有部分抗原用EDTA缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。特别是对于某些核抗原效果会更明显。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
使用方法：
1．对于石蜡切片：
①切片脱蜡至水。
②3%H2O2处理切片10分钟。
③自来水冲洗，蒸馏水洗。
④抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2．对于冰冻切片：
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
3．对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项：
1.本抗原修复液使用前必须用重蒸水稀释10倍，配制成抗原修复液(1×)。
2.请使用足量的修复液，修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
3.根据你的切片具体情况选择修复时间，如组织粘片不牢，容易掉片，请酌情减少修复时间。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


北京CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒价格关键词：CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒,ZN0288,百奥莱博

SY0583 线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析) Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit ( flow cytometry)
说"
YT258 STAT5凝胶迁移探针(1.75μM) STAT5 Probe For EMSA(1.75μM)
SV1472 T7 表达晶体 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )
BTN60706 一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂 One-tube DNA agarose gel recovery reagent
YT057 考马斯亮蓝染色液(常规法) Coomassie Blue Staining Solution
YT913 结晶紫染色液 Crystal Violet Staining Solution
HR0125 甲醛固定组织蛋白提取试剂盒 Formalin fixed tissue protein extraction kit
BTN131048 胆酸* Sodium Cholate
SV0038 AluI限制性内切酶 AluI Restriction Endonuclease
SY0322 预活化正钒酸*溶液 Sodium Orthovanadate (Vanadate) Solution, Pre-activated
KFS094 10×CAPS电转移缓冲液(不含甘*酸，适合大分子量蛋白转移)
BTN101203 1M Tris-HCl(pH6.5)(DNA级)
SV0961 DNA 聚合酶 I，（Klenow）大片段
BTN71203 植物RNA柱式提取试剂盒 Plant RNA Column extraction kit
WE0147 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针) Super TaqMan OneStep RT-qPCR Kit
YT363 NF-κB激活－核转运检测试剂盒 NF-κB Activation，Nuclear Translocation Assay Kit
SV1623 CLIP-Surface 647
BTN90708 即用型高保真PCR试剂盒 Instant HiFi PCR MasterMix
YT156 Tubulin抗体 anti-Tubulin antibody
SY0074 LXR-Luc荧光素酶报告基因质粒 LXR luciferase reporter plasmid

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购北京CHRM1 mRNA原位杂交试剂盒价格。