EDTA抗原修复液(10×)厂家现货

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EDTA抗原修复液(10×)厂家现货是高品质的免疫检测产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多EDTA抗原修复液(10×)等免疫检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：EDTA抗原修复液(10×)厂家现货
编号：ZN1951
规格：100ml
品牌：百奥莱博
产地：北京
规格说明：一个包装的本产品可以配制成 1000 毫升抗原修复液(1×)。按照每张标本需 10ml 抗原修复液(1×)计算，一个包装的本产品约可用于100 个样品。
产品用途：本产品特别适合用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。
保存条件：4℃或-20℃保存，一年有效
产品简介：
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。因此，对于石蜡切片，要求在进行 IHC 染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。EDTA 缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC 抗原修复液。有部分抗原用 EDTA 缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。特别是对于某些核抗原效果会更明显。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
使用方法：
1．对于石蜡切片：
①切片脱蜡至水。
②3%H2O2处理切片10分钟。
③自来水冲洗，蒸馏水洗。
④ 抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约 15分钟(加热时间可以控制在 10-20分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2．对于冰冻切片：
用免疫染色洗涤液洗涤切片 5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约 15分钟(加热时间可以控制在 10-20分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
3．对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项：
1.本抗原修复液使用前必须用重蒸水稀释 10倍，配制成抗原修复液(1×)。
2.请使用足量的修复液，修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
3.根据你的切片具体情况选择修复时间，如组织粘片不牢，容易掉片，请酌情减少修复时间。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

EDTA抗原修复液(10×)厂家现货极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·小鼠白介素17C(IL-17C)检测试剂盒
编号：ZN2654
英文名称：Mouse Interleukin-17C ELISA Kit
规格：96T
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法，用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中IL-17C的含量。预先包被的抗体和检测相抗体都是IL-17C单克隆抗体。检测相抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠IL-17C呈正相关。

Interleukin 17C与IL17有相似的序列，IL-17C可以刺激单核细胞系释放TNF-α和IL1。IL-17C可以活化T细胞。IL-17C在一些成人组织和激活T细胞不存在，且与IL17受体不结合。

检测指标：Interleukin-17C；IL-17C；IL17C
检测范围：125pg/ml～8000pg/ml
特异性：系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性：＜10pg/ml

产品组成：

 

组分	规格	数量
预包被抗小鼠IL-17C抗体的96孔板	96T	1板
重组小鼠IL-17C标准品(冻干)	10ng/管	2管
生物素标记抗小鼠IL-17C(100X)	130μl	1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X)	130μl	1管
样品稀释液	30ml	1瓶
抗体稀释液	12ml	1瓶
ABC稀释液	12ml	1瓶
TMB显色液	10ml	1瓶
TMB终止液	10ml	1瓶
洗涤缓冲液(25X)	20ml	1瓶
封板膜		4张

储存条件：2-8℃（频繁使用时），-20℃（长时间不用时）
有效期： 6个月(4℃)；12个月（-20℃）

参考标准曲线数据：(取自某一批次质检数据，仅供参考，用户需要自己建立标准曲线)

浓度(pg/ml)	0	125	250	500	1000	2000	4000	8000
OD值	0.088	0.113	0.199	0.307	0.484	0.829	1.254	1.911

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GL1922 *检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝微板法) 100T
SK109 丙*(代"酮")酸激酶检测试剂盒 Pyruvate Kinase Test Kit
GL1001 TBS缓冲液(0.02mol/L,pH8.2) 500ml
GL0545 Zamboni固定液 500ml
GL1680 甲*(代"酚")红溶液(10mmol/L) 10ml
SNM500 即用型SP免疫组化试剂盒(适用小鼠或兔中的一种) SP immunohistochemistry kit
SNM182 乳酸脱*酶试剂盒(微板法) Lacate dehydrogenase assay kit
GL0277 PBS-EDTA缓冲液(pH8.0) 4×PE 500ml
GL1426 Acr-Bis(30%:1.8%) 500ml
SNM299 脑脊液蛋白测试盒(磺基水杨酸法) CSF protein Assay Kit
GL2085 α-岩藻糖苷酶(AFU)检测试剂盒(PNP-F终点比色法) 100T
SK254 BCA蛋白法含量检测试剂盒 BCA protein assay kit
GL1181 *化乙锭溶液(EB,1mg/ml) 10ml
SNM097 γ-谷*酰半胱*酸合成酶测定试剂盒(微量定磷法) Gamma-glutamylcysteine synthetase
GL1857 尿本-周氏蛋白定性检测试剂盒(对甲*磺酸法) 50T
SK050 总抗氧化能力检测试剂盒 T-AOC Test Kit
GL0916 亮绿染色液(1%) 100ml
GL0459 Perenyi"s脱*液 500ml
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·FGF2 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0505
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse,rabbit
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.FGF2 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
FGF2的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

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