microRNA荧光定量PCR试剂盒厂家现货

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖microRNA荧光定量PCR试剂盒厂家现货在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：microRNA荧光定量PCR试剂盒厂家现货
编号：ALH190
规格：50μl×50次
英文名：miRNA fluorescent quantitative PCR detection kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测。本试剂盒包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix（含Sybr Green）是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂，其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式， 配合特殊的Buffer 体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内进行准确定量。（该试剂盒须与miRNA对应cDNA第一链合成试剂盒（ALH189）配套使用。）

试剂盒组分(25次)：
2 x miRNA qPCR Mix(With Sybr Green)———————1.25 ml
Reverse primer(10μM)——————————————55μl

需自备的试剂：
1. 分子生物学实验级别的水（无核酸酶）
2. 待检测miRNA对应的qPCR上游引物（Forward primer）

Forward Primer设计原则：
1. 遵循引物设计的最普遍原则。
2. 以成熟的miRNA 序列为基础，将U替换成T，这是最基础和最简单的设计方法。
3. 试剂盒中提供的下游引物的Tm 值为65℃，设计上游引物的Tm 值要尽量保证在65℃左右。
4. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过低，可以在引物的5’端添加几个碱基（最好为G或C碱基）；也可以在’3端添加1 个或几个A 碱基；或者5’端和3’端同时修饰。
5. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过高，可以在引物的5’或3’端去掉几个碱基。

注意事项：
1. miRNA 第一链cDNA 的加入量不要超过real time PCR 体积1/10。
2. 对于特殊的检测体系中，高含量的cDNA 模板易导致非特异性扩增，根据所检测miRNA 的丰度适当的稀释cDNA（10倍或者100倍）。
3. 本品中含有荧光染料Sybr Green，I保存本品或配制PCR 反应液时应避免强光照射。
4. 2×miRNA qPCR Mix不含参比染料ROX，客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

本品别名：miRNA荧光定量PCR检测试剂盒|microRNA荧光定量PCR试剂盒|microRNA荧光qPCR试剂盒|miRNA荧光定量检测试剂盒

关于microRNA荧光定量PCR试剂盒厂家现货的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·血液miRNA提取试剂盒
编号：ALH071
英文名称：Blood microRNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解全血（液体样本）和灭活细胞RNA酶，强烈有机抽提去除蛋白和DNA，RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质进一步去除， 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15¬-30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收，酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA，对于血液样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。

产品组分：
Lysis buffer———————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.独特的裂解液配方，可直接裂解全血，不需要先裂解去除红细胞。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RNAi，RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

注意事项：
1. 第一次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇，*仿，一次性注射器，研钵。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）
6. RNA 纯度及浓度检测：
完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。
浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40。

储存条件：室温，有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)

本制品别名：血液miRNA纯化试剂盒|血液miRNA分离试剂盒|血液microRNA提取试剂盒|血液microRNA分离试剂盒|血液microRNA纯化试剂盒|全血总RNA提取试剂盒|全血miRNA提取试剂盒|全血microRNA提取试剂盒


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RFT005 200bp DNA ladder(200～3000bp)
SY0159 Sox2-GFP报告基因质粒 Sox2 GFP Reporter Plasmid
HR0467 Cycloheximide  Cycloheximide
BTN131209 MMLV逆转录酶(无RNase H活性) MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
SV0560 NotI-HF RE-Mix限制性内切酶 NotI-HF RE-Mix Restriction Endonuclease
SY0518 植物血凝素 Phytohaemagglutinin M(PHA-M)
KFS281 Rapamycin 自噬诱导剂，mTOR抑制剂 Rapamycin(Sirolimus)
SV0005 Acc65I限制性内切酶 Acc65I Restriction Endonuclease
SV1389 T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）
BTN100875 DNA非变性PAGE上样液 DNA Native PAGE Loading Buffer
WE0400 口腔拭子DNA样本保存管 Swab DNA Storage Tube
YT610 RIPA裂解液(中) RIPA Lysis Buffer
HR0007 膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒
BTN100929 细菌膜蛋白质微量提取试剂盒 Bacterial Membrane Protein Miniprep Kit
YT349 HMG-CoA Reductase抑制剂(Simvastatin) HMG-CoA Reductase Inhibitor
SY0263 50×TAE缓冲液 50×TAE Buffer
KFS037 Cy3标记抗山羊免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorescence Staining Kit with Cy3-Labeled Donkey Anti-Goat IgG
BTN130874 人玻连蛋白 Vitronectin
SY0060 VDR萤火虫荧光素酶报告基因质粒 VDR(Vitamin D Receptor) luciferase reporter plasmid 
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·一步法荧光定量RT-PCR试剂盒
编号：ALH195
英文名称：One Step qRT-PCR Kit
规格：50μl×50次|50μl×100次
本试剂盒是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂，用本制品进行Real Time qRT-PCR 可在同一反应管内连续进行。反应过程中无需打开管盖添加试剂并可对扩增产物进行实时检测，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。非常适合于微量RNA 尤其是微量RNA病毒的检测。本试剂盒包括最适合Real Time PCR的突变改造M-MuLV H Minus逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性。同时该酶提高了耐热性，可以在42-50℃反转录，提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率。而采用优质热启动酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生，大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。

试剂盒组份(50次)：
2 XqRT-PCR Mix (含Sybr Green I)-——————1.25ml
OneStep Enzyme Mix—————————————100μl
RNase free H2O———————————————1.5ml

适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；部分高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。

注意事项：
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液（Master Mix，其中包括RNase-free ddH2O、Buffer、各种酶等），然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用Enzyme Mix时，分取之前要小心地瞬间离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
3. 2×qRT-PCR Mix内含Sybr Green I，保存或配制One Step qRT-PCR反应液时应避免强光照射。
4. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板。
5. 不同的片段，所需最佳RNA模板用量不同，过多的RNA会抑制反应，建议根据反应调整模板用量。
6. 只能使用特异性引物，不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 进行反应。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

本制品别名：一步法qRT-PCR试剂盒|一步法RT-qPCR试剂盒

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