Pfu DNA聚合酶报价

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名称：Pfu DNA聚合酶报价
编号：ALH223
规格：500U|3000U
英文名：Pfu DNA Polymerase
品牌：百奥莱博
产地：北京
本酶用于DNA的高保真扩增，，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析（SNP）和平末端补平等。是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌中分离纯化的， Pfu DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。Pfu酶是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率最低的。其PCR产物为平端，可直接用平端载体克隆。 高保真PFU对于dNTP纯度要求很高，因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。本酶浓度为5U/μl。

本品组份(500U)：
Pfu DNA Polymerase———————————————500U
10×Pfu Buffer+(with MgSO4)-——————————1ml
SuperPure dNTP mix(10 mM Each)—————————0.2ml

单位定义：一个单位Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制：SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

酶贮存缓冲液：50mM Tris-HCl(pH 8.2)，0.1mM EDTA，1mM DTT，Stabilizers，50% glycerol。

10×Pfu Buffer (含Mg2+)：200 mM Tris-HCl (pH8.8)，100 mM KCl，100 mM(NH4)2 SO4，20 mM MgSO4，其他成分。

注意事项：
(1) Pfu酶具有3′-5′的外切酶活性，所以Pfu酶扩增时延伸速度比Taq酶低，应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间，建议Pfu酶的延伸速度为每分钟1kb 如扩增片段小于4kb；延伸速度为每分钟0.5kb 如扩增片段大于4kb。同时Pfu酶的3′-5′的外切酶活性可能降解引物， 所以应先加dNTP 后，再加Pfu酶到反应体系中，并立即进行PCR 反应。
(2) 用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，Tm在55～80℃ 之间，引物浓度在0.1～0.5μM之间，比Taq酶略高。
(3) Pfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu酶的活性无影响。
(4) 高保真PFU 对于dNTP纯度要求很高，因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。

储存条件：-20℃。

本品别名：Pfu DNA聚合酶|pfu酶

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·细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒
编号：ALH157
英文名称：Cells Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒适用于快速提取凋亡DNA Ladder。细胞发生凋亡时，染色质DNA在核小体之间发生断裂，最终形成200bp整数倍的DNA片段，这些DNA片段被提取后，经电泳及*化乙锭染色后形成梯子状外观，谓之DNA Ladder。血液和组织培养细胞在裂解/结合液中裂解后，释放出来的DNA片段在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将DNA Ladder片段从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(50次)：
裂解/结合液CB————————15 ml
漂洗液WB——————————15 ml
洗脱缓冲液EB————————15 ml
吸附柱AC——————————50个
收集管(2ml)—————————50个

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.本公司独特的裂解/结合液配方有效裂解细胞，使用本试剂盒不需要加入昂贵的蛋白酶K处理，大大降低了使用成本和加快了处理速度。
3.节省时间，简捷，单个样品操作一般可在10分钟内完成。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
3. 裂解/结合液CB 含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 一般2×106 培养细胞DNA 产量为10-20μg， 200μl 人全血典型产量为3-6μg。
5. 一般电泳检测时典型上样量为2-3μg 纯化的DNA，如果凋亡率低，有可能只见到基因组DNA，而见不到DNA ladder，可以试试加大上样量。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：凋亡DNA Ladder快速提取试剂盒


Pfu DNA聚合酶报价关键词：Pfu DNA聚合酶,pfu酶

BTN100601 细胞核微量制备试剂盒 Nuclei Miniprep Kit
YT593 D-苏*酸醛缩酶 D-Threonine Aldolase (Crude Enzyme)
ALH343 T载体连接试剂盒 T vector ligation Kit 
BTN90613 动物细胞核蛋白微量制备试剂盒 Animal Nuclear Protein Miniprep Kit
RFT095 2×Taq PCR MasterMix
SY0246 荧光定量PCR核酸染料(20×) nucleic?acid?gel?stain, 20×concentrate in?water
KFS020 TRA-1-81免疫组化试剂盒(IHC)
BTN130875 葡激酶 Staphylokinase
SV0805 Nb.BsrDI切刻内切酶 Nb.BsrDI切刻内切酶
SY0613 重组人IFN-β1b Recombinant Human IFN-β1b
KFS365 葡萄糖-6-磷酸脱*酶测试盒(G-6-PD)
YT286 一氧化*(代"氮")检测试剂盒 Nitric Oxide Detection Kit
SV1521 β1-4 半乳糖苷酶
BTN90604C PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒 PCR DNA Labeling Kit(Digoxin)
YT085 漂片抗原修复液(10X) Antigen Retrieval Solution for Floating Sections
YT950 考马斯亮蓝R250 Coomassie brilliant blue R250
HR0181 藻类蛋白提取试剂盒(2D电泳用) Algal protein extraction kit (2D electrophoresis)
BTN100915 SDS-PAGE预制胶 Instant SDS-PAGE Gel
Pfu DNA聚合酶报价关键词：Pfu DNA聚合酶,pfu酶


·高保真PCR MasterMix
编号：ALH211
英文名称：2×KOD PCR MasterMix
规格：1ml
本品用于PCR，尤其用于PCR产物的克隆，DNA片段的平滑化。是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的超强3’→ 5’外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase更高，保真性是Taq的约50 倍，同时具有合成速度快的特点，聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase 的5倍，Taq DNA Polymerase 的2倍，达到100-138bp/秒，可以在短时间内获得高产量的扩增产物，特别适合于高保真地扩增6kb以内的PCR产物，扩增所得的DNA为平末端，可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。本产品包含KOD DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。本产品使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2×KOD PCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。

单位定义：75℃活性测定条件下，在30min内摄入10nmol的dNTPs 使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1U。

储存条件：-20℃。

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