一管式定点突变试剂盒批发

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")一管式定点突变试剂盒批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一管式定点突变试剂盒批发
编号：ALH355
规格：10次|20次
英文名：One Tube Site-specific Mutagenesis Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒是基于PCR原理向目的DNA片段（一般为质粒）中引入碱基的点突变，多个邻近密码子的突变，单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)等。一般宿主菌培养扩增的质粒DNA是甲基化的，PCR扩增新合成的DNA是非甲基化的。首先以待突变的甲基化质粒为模板，利用超快高保真的SuperPfu聚合酶实现突变质粒的合成（非甲基化，包含突变点，且有两个缺刻点nick点），再利用Dpn I酶选择性降解甲基化的模板质粒 ，剩下的新合成非甲基化的突变质粒转入大肠杆菌后，质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复，得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。一般可以产生大于90%的突变效率。本试剂盒适用于<12kb甲基化质粒中核苷酸的突变。

试剂盒组分(10次)：
SuperPfu DNA polymerase——————5μl
10×SuperPfu Buffer————————100μl
Dpn I——————-——————-——5μl
10mM dNTP Mixture-——————-——25μl

试剂盒特点：
1、简单，一个PCR管中完成所有操作，速度最快。
2、采用部分重叠引物设计，使PCR呈指数扩增，扩增产物凝胶电泳可见增加成功率。
3、效率高，使用Dpn I去除非突变模板，突变效率高达90%；不需要使用特殊感受态细胞降解非突变质粒。
4、采用分子进化改造的SuperPfu可以提供4倍-6倍于pfu的扩增速率提高和3倍于pfu的超高保真性。

储存条件：-20℃，有效期一年。

本品别名：一管式定点突变试剂盒|一管式突变试剂盒

一管式定点突变试剂盒批发极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
SV0038 AluI限制性内切酶 AluI Restriction Endonuclease
BTN131048 胆酸* Sodium Cholate
HR0125 甲醛固定组织蛋白提取试剂盒 Formalin fixed tissue protein extraction kit
YT913 结晶紫染色液 Crystal Violet Staining Solution
BTN130653 GpC甲基转移酶(M.CviPI) GpC Methyltranferase(M.CviPI)
BTN60706 一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂 One-tube DNA agarose gel recovery reagent
SV1472 T7 表达晶体 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )
YT258 STAT5凝胶迁移探针(1.75μM) STAT5 Probe For EMSA(1.75μM)
BTN140379 大肠杆菌Rosetta感受态细胞 E.coli Rosetta Competent Cell
SY0583 线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析) Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit ( flow cytometry)
SV0730 SspI-HF限制性内切酶 SspI-HF Restriction Endonuclease
WE0246 2kb DNA Marker
HR0940 辅酶Q10(Co10)检测试剂盒 Coenzyme Q10 (Co10) ELISA Kit
SY0218 HNF1-GFP报告基因质粒 HNF1 GFP Reporter Plasmid
RFT065 30％丙稀酰胺溶液(29:1) 30％ Acylamide Solution(29:1)
KFS192 Annexin V-kFluor488/PI双染细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-keyFlour488 Apoptosis/PI Detection Kit
ALH260 耐热M-MuLV反转录酶 Thermostable M-MuLV reverse transcriptase
一管式定点突变试剂盒批发关键词：一管式定点突变试剂盒,一管式突变试剂盒

HR0318 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物片剂(EDTA Free) Protease and phosphatase inhibitor mixture tablet (Free EDTA)
SV1308 pBR322 DNA-BstNI 消化
YT151 Bcl-2抗体 anti-Bcl-2 antibody
BTN70902 5M甜菜碱溶液，PCR级 Betaine Solution, PCR Grade
SY0475 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC) TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
SV0433 Hpy188III限制性内切酶 Hpy188III Restriction Endonuclease
WE0142 快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料) BaFaSYBR Mixture(Low ROX)
BTN160906 植物RNA提取试剂盒(无酚无*仿柱式提取) Plant RNA Column extraction kit(No phenol and no chloroform)
SY0114 pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照 pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control
BTN101201 10%SDS溶液(DNA级)
KFS089 8-16%预制胶(205-14 kDa分离范围;12个样/胶)
ALH074 石蜡包埋组织miRNA提取试剂盒 Paraffin Embedded Tissues microRNA Extraction Kit
YT404 DNA末端平滑试剂盒 DNA Blunting Kit
BTN131056 TCEP溶液(0.5M) TCEP Solution
HR0115 大肠杆菌膜蛋白提取试剂盒 Escherichia coli membrane protein extraction kit
SV1025 Taq DNA 连接酶
YT052 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) SDS-PAGE Sample Loading Buffer，6X
BTN50903 微量核酸沉淀剂 NA Precipitation Solution
SV1466 Turbo E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )
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·通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)
编号：ALH033
英文名称：Universal Plant RNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒适用于快速提取植物组织RNA，使用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，DNase直接在柱上消化残留DNA，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒特点：
1.完全不使用有毒的Beta-巯基乙醇，*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷，单个样品操作一般可在40分钟内完成，世界上最简单快速的试剂盒。
3.配套DNase I 柱上消化，得到的RNA不残留DNase消化，可直接用于反转录荧光定量PCR、二代测序、芯片、RACE等实验。
4.世界领先，是同类产品中适应性最广泛的试剂盒，可以提取包括水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物。
5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.2，无DNA残留,可直接用于荧光定量PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot等各种实验。

试剂盒组份：

 

组份	50次
裂解液RPA	50ml
去蛋白液RW1	40ml
漂洗液RW	10ml
RNase-freeH2O	10ml
DNaseBuffer	1.25ml×2/td>
Rnase free DNaseI	0.25ml
吸附柱和收集管	50套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机。
2. 需要自备乙醇，研钵(可选)。
3. 裂解液RPA和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

提示：第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶加入指定量无水乙醇!

1. 直接研磨法（推荐）:
a. 新鲜植物组织称重后取100mg 迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg 放入研钵）， 加入1 ml 裂解液RPA 室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液RPA 立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
b. 将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡15 秒，13,000rpm 离心5-10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
c. 取480μl 裂解物上清（在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
d. 立刻接操作步骤的步骤3。

2. 液氮研磨法:
a. 取500μl 裂解液RPA，转入1.5ml 离心管中。
b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg 细粉转入上述装有RPA 的离心管, 立即用手剧烈振荡20 秒，充分裂解。
c. 用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒)，可以剪切DNA，降低粘稠度和提高产量。
d. 将裂解物13000rpm 离心5-10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
e. 取裂解物上清（在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
f. 立刻接操作步骤的步骤3。
注意：以上液氮研磨法用户可以根据需要加倍处理，可以提高产量。也就是使用1ml 的裂解液RPA和100mg的样品。

3. 将混合物(每次小于720μl，多可以分两次加入)加入一个吸附柱 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 离心2 分钟，弃掉废液。确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。

4. 加350μl 去蛋白液RW1，室温放置1 分钟，13,000rpm 离心30 秒，弃掉废液。

5. DNase I 工作液配制：取45μl DNase I buffer 和5μl RNase free DNase I 在离心管轻轻吹打混匀成工作液（处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液）。

6. 向吸附柱 中央加入50μl 的DNase I 工作液，室温（20-30℃）放置15 分钟。
注意：直接将工作液滴在膜中央上，不要让工作液滴在O 型圈或是离心柱管壁上。

7. 向吸附柱 中加入350μl 去蛋白液RW1， 12000rpm 离心30 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。

8. 加入500μl 漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），13000rpm 离心30秒，弃掉废液。加入500μl 漂洗液RW，重复一遍。

9. 将吸附柱 放回空收集管中，13000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

10. 取出吸附柱，放入一个RNase free 离心管中，根据预期RNA 产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water（事先在70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放置1 分钟，12000rpm 离心1 分钟。

11. 如果预期RNA 产量>30μg，加30-50μl RNase free water 重复步骤10，合并两次洗液，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA 浓度高)。

洗脱两遍的RNA洗脱液RNA浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%，但是浓度要低，用户根据需要选择。

注意：如果不需要做荧光定量PCR，仅仅做普通的反转录，克隆基因片段，可以省略DNA 酶柱上消化的步骤，具体就是第4 步骤的“加350μl 去蛋白液RW1”改成“加700μl 去蛋白液RW1”，同时省略步骤5，6，7。

储存条件：室温，有效期12个月(DNase I及其Buffer需-20℃保存)

本制品别名：植物通用RNA提取试剂盒|通用植物RNA提取试剂盒|通用植物RNA纯化试剂盒

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