BAC大型质粒提取试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括BAC大型质粒提取试剂盒厂家在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：BAC大型质粒提取试剂盒厂家
编号：ALH091
规格：20次
英文名：Large Plasmid Extraction Kit(for cell transfection)
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒制备。常规的离心柱型质粒抽提试剂盒并不适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒DNA的抽提。这主要是因为大型质粒DNA分子量很大，常常会超过100kb而且一般拷贝数低产量低，使用常规的离心柱吸附膜吸附效率和产量很低而且过膜会打断这些大分子量的质粒DNA。本试剂盒采用改进碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA，采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂，只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质，获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右，得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作，方法简单，不需特殊设备，无需过柱，不用酚*仿抽提；基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒，不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA，对质粒损伤小，即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒，只要碱裂解法能够提取，就可以有效纯化。此外溶液型的试剂可以按照比例放大缩小进行小提/中提/大提，最后可选择任意小体积溶解质粒，浓度可高达3μg/μl。

试剂盒组份(20次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————1.3ml
溶液P1—————————————130ml
溶液P2—————————————100ml
溶液PⅢ-————————————110ml
杂质清除剂A-——————————3ml
杂质清除剂B-——————————30ml
内毒素清除剂——————————10ml

试剂盒特点：
1.不需要使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从150-200 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.4-1mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高，超螺旋比例高，纯度好，可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低（<0.1 EU/μg DNA），可直接应用于细胞转染。

注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔，应该使用剪大了开口的吸头，防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后，可能看不到明显沉淀。如未见沉淀，担心DNA 丢失，可保留上清液，待完成全部操作后电泳鉴定，以确定是否获得终产物（数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上，可能无法看到明显团块）。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2 条或者多条DNA 条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA 分子量Marker 才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道确切大小。

储存条件：室温，有效期18个月。

本品别名：大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)|大型质粒提取试剂盒|大型质粒大量制备试剂盒|无内毒素大型质粒提取试剂盒|转染级质粒大量提取试剂盒|细胞转染用大型质粒制备试剂盒|BAC大型质粒提取试剂盒|PAC大型质粒提取试剂盒|P1大型质粒提取试剂盒|Cosmid大型质粒提取试剂盒

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·一步法耐热RT-PCR试剂盒
编号：ALH272
英文名称：One step reverse transcription heat-resistant PCR Kit
规格：50μl×50次|50μl×100次
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的，使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录，大大提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率，产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。

试剂盒组分(50次)：
2×RT-PCR Mix——————————625μl
Enzyme Mix-———————————25μl
耐热RTase————————————25μl
RNase free H2O-—————————1.5ml

适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；适用于高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。

注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
3. 不同的片段，所需最佳RNA模板用量不同，过多的RNA会抑制反应，建议根据反应调整模板用量。
4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。

储存条件：-20℃，有效期半年。

本制品别名：耐热一步法反转录PCR试剂盒


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·RNA酶抑制剂
编号：ALH056
英文名称：RNase Inhibitor
规格：2000U
本品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白，与RNase A形成1：1复合体，对RNase 表现高度的非竞争性抑制（Ki=3×10-10 M）。该反应是可逆的，通过尿素及疏基类试剂能够解离复合体，使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂（核酸类、无机磷酸类）不同，可以很容易地通过*酚处理将其从反应体系中除去。

活性定义：抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位（U）

储存条件：-20℃

本制品别名：Rnase抑制剂

·DNA转染试剂
编号：ALH430
英文名称：DNA transfection reagent
规格：0.5ml|1ml
本试剂采用独特配方的阳离子聚合物为主要成分，可以与DNA形成稳定的复合物，保护DNA免受核酸酶的降解,在增加核酸稳定性的同时, 提高转染试剂/DNA复合体穿越细胞膜的效率，这种独特设计，显著提高了基因转染效率。此类试剂是目前非病毒介导方法中效率最高的转染试剂（不同种类细胞的转染效率可有明显差异）。此外本品不被血清清除，血清和抗生素不影响其转染效果，转染试剂/DNA复合物可以直接加入完全细胞培养基中。本品的细胞毒性很小，在适宜的条件下，根据推荐用量使用本试剂进行转染实验，细胞存活率高于90%.每一批产品出厂前都要对其转染效率和毒性经过严格质控。 1ml本DNA转染试剂可进行500次转染（6孔板或35mm平皿）。

产品特点
1.适应于众多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染
2.适用于瞬时转染和稳定转染
3.适应于贴壁细胞和悬浮细胞转染
4.转染效率高且稳定，在有无血清存在的细胞培养基中均能获得高效率转染
5.细胞毒性低
6..转染程序简单，转染实验可以在半小时内完成

注意事项：
1. 少量使用本试剂时，可取精确量的本试剂用无菌超纯水稀释一定倍数，以便精确取样量。该稀释液可在4℃保存1月左右。
2. 细胞的生长状态是转染效率的一个主要决定因素。在实验条件许可的情况下，使用高质量的培养液、优质血清等，可能会明显提高转染效率。
3. 本试剂在转染中不受血清影响，所以本试剂/DNA复合物能直接加到含血清的培养基中，但稀释本试剂和DNA的缓冲液不能混有血清，因为本品在制备本试剂/DNA复合物之前可能会与血清中的蛋白质反应，影响转染效率。
4. 如果细胞株很敏感，孵育2～4小时后除去转染复合物并加入含血清的新鲜培养基。

储存条件：4℃，有效期1年。

本制品别名：基因组转染试剂


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·T载体连接试剂盒
编号：ALH343
英文名称：T vector ligation Kit
规格：20次|60次
本试剂盒载体来源于pBlueScript II SK(+) 质粒，在EcoRI酶切位点处添加了适当序列，经XCM I 酶切后其3’末端直接产生未配对的T碱基而成，因此有更高的重组效率。本载体插入位点两端独特设计的两个ECOR I位点使插入片段可以用廉价高效的ECOR I单酶切检测； 同时本载体不含NdeI或NcoI限制性内切酶位点，可方便用于克隆含上述酶切位点的基因。此外，本公司载体连接体系还有背景低（蓝斑小于10%），重组率高（白斑中超过90%有插入片段），可快速连接等特点。说明书末列出了载体相关的技术资料，其全序列可参照pBlueScript II SK(+)序列，只是其多克隆酶切位点处序列稍有不同。

试剂盒组份：
T Vector(30ng/μl)——————————20μl
1000bp Control（30ng/μl）-——————5μl
10 × PEG Enhancer-——————————50μl
2×Quick Ligation Buffer-———————100μl
10×Ligation Buffer——————————40μl
T4 DNA ligase（5Uμl）—————————20μl

储存条件：-20℃。

本制品别名：T克隆试剂盒

·M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)
编号：ALH257
英文名称：M-MuLV Reverse Transcriptase
规格：10KU|10KU×5
本品是使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本酶浓度200 units/μl，合成cDNA片段长度最高可达12kb。

试剂盒组分(10KU)：
M-MuLV RTase(200U/μl)———————10000U
5×RT Buffer————————————500μl

注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。

储存条件：-20℃。

本制品别名：M-MuLV反转录酶(RNase H活性缺失)|N-MuLV Rtase

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