RNA样品高效保存液价格

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北京百奥莱博专业生产供应RNA样品高效保存液价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：RNA样品高效保存液价格
编号：RFT033
规格：100ml
英文名：RNA sample efficient preservation solution
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂是一种无毒的可直接使用的样品储存液，能使细胞内的RNA与RNA酶分离，可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入保存液中，在室温可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃标本可以长期保存，RNA稳定存在不降解，取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。

操作步骤：
1、根据要保存的各样本的体积，计算出所需保存液用量。保存液的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml保存液)；离心收集2×107细胞保存液的用量是1ml。加入保存液的原则是：量宁多勿少。
建议在实际操作中不要称量组织，而直接根据目测结果加入保存液量，以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块，体积为125mm3=125μl，故应当加入1.25ml的保存液液。
2、将保存液按需要量分装入自备保存管中；
3、快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，较小的组织直接取下，立即完全浸入保存液中。
注：组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则保存液不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0.5 cm的任意片状后保存，较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官)则可以直接浸入保存液。
4、保存时先将样本浸入保存液后置4℃冰箱过夜(注：4℃过夜是必需的，这样可使保存液完全渗入到组织中)，然后转移到-20℃冰箱(保存液在-20℃时可能为液态，也可能为固态，如有结晶析出，也是正常情况)；或者在4℃冰箱过夜后，直接转移到-80℃冰箱。在保存液中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

注意事项：
1、组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入保存液，以防止RNA降解。
2、冰冻组织不能用保存液保存，因为保存液不能有效渗入冰冻组织。
3、保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复温到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除保存液，再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量保存液保存液不影响后继提取RNA的质量。
4、保存液在动物组织(如大鼠肝脏，脾脏)和细胞(如DH5α)RNA的保护中效果不错；植物材料种类繁多，没能一一测试(烟草和拟南芥叶片中的RNA能被保存液有效保护)，建议预实验后再使用。

储存条件：15～25℃，有效期24个月。

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·5×加A反应液
编号：RFT097
英文名称：5×A-plus MasterMix
规格：20次(200μl)
本品由pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段，如该平末端DNA片段需要和T载体相连接，需要先利用加A反应液在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。本MasterMix提供了加A尾需要的所有成分，可以在20分钟左右完成整个过程。用于平末端片段的加A反应。

使用方法：
1、平末端PCR产物用PCR产物纯化试剂盒(无非特异扩增；货号RTP2202)或凝胶回收试剂盒纯化(有非特异扩增，货号RTP2201)回收。
2、纯化后的平末端DNA片段按照以下反应体系加A，全量为50μl：
平末端DNA片段——————0.5～5μg
5×加A反应液-——————10μl
ddH2O——————————up to 50μl

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


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·QuickLan蛋白染色液
编号：RFT053
英文名称：QuickLan protein staining solution
规格：500ml
本蛋白染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分，采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。

特点：
1、方便快捷-不用漂洗，不用加热，不用脱色，不用固定，条带2分钟可见；
2、灵敏度高-检测下限10ng蛋白；
3、兼容性好-适用于变性和非变性胶以及质谱分析；
4、绿色环保-不含甲醇，冰醋酸。

用前必读：
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀，请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm厚度，10×10cm凝胶染色程序。

使用方法：
1、将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中，用适量蒸馏水漂洗一下。
2、弃蒸馏水，加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适)，摇床上常温摇动，根据下表确定染色时间。

 

待检测蛋白量	染色时间
＞1 μg	2分钟
100ng-1μg	10分钟
10ng-100ng	60分钟

3、观察记录结果。

附：质谱处理程序
1、切下待检蛋白条带置于1.5ml离心管中。
2、加入1ml 30%乙醇或30%丙*(代"酮")(也可用30%醋酸，但会导致蛋白N端酰基化)。
3、处理30分钟。
4、重复步骤2，3直到去除所有染料。一般处理2-3次既能完全去除染料。
5、质谱分析。

注意事项：
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm，厚度0.75mm的凝胶，如果使用更大面积或更厚的凝胶，请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2、常规染色所需的漂洗，固定，脱色步骤都无必要。
3、本染色液可以重复利用1-2次，敏感性会有轻微下降，请延长染色时间。
4、本染色液有轻微腐蚀性，请带手套操作。使用后，请盖好瓶盖，常温密封保存。

问题分析：
1、QuickLan染胶的最佳温度是多少？
为达到最佳的染色效果，推荐常温(20-25℃)染色。
2、QuickLan溶液需要低温贮存吗？
QuickLan不需要低温贮存，常温贮存(20-25℃)即可。4-8℃贮存，QuickLan会有结晶生产，37℃温浴融化后可继续使用。
3、QuickLan的染色原理是什么？
QuickLan染色原理与经典考马斯亮蓝G250染色原理相同(与蛋白质中碱性*基酸结合)，优点是更加快速和更高的灵敏度。
4、QuickLan染色后，凝胶可以用蒸馏水保存吗？
可以，蒸馏水保存最为简单，也可以保存在稀释的冰醋酸中。
5、QuickLan染色后的凝胶能做质谱分析吗？
可以。请参阅“质谱处理程序”
6、QuickLan染色的凝胶能做Weatern Blot吗？
不可以。蛋白的染色是不可逆的，染色的凝胶不能用作下游的转膜操作。
7、QuickLan能重复使用吗？
QuickLan可以重复使用2-3次，但灵敏度有所下降，可以通过延长染色时间来弥补。
8、为什么凝胶过夜染色后条带出现涂抹状拖尾？
QuickLan过夜染色不会对凝胶过度染色。出现抹涂状拖尾原因是上样量太大，因为QuickLan染色灵敏度较高。另外，分子量较小的蛋白在过夜染色中会有扩散现象，我们推荐染色最好在60分钟内完成。
9、QuickLan有固定凝胶的作用吗？
QuickLan是水系溶液，没有固定凝胶的作用。然而，由于染色会在60分钟内完成，染色前无需对凝胶进行固定。

储存条件：室温，有效期一年。


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·细菌基因组DNA提取试剂盒
编号：RFT037
英文名称：Bacterial genomic DNA Extraction Kit
规格：50次|100次
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取细菌(革兰氏阳性菌和阴性菌)的基因组DNA。溶菌酶能有效去除细菌细胞壁；蛋白酶K能把核酸解离出来； RNaseA能去除痕量的RNA污染；离心吸附柱能够高效、专一吸附DNA，最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物，提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

试剂盒组成：

组份	50次	100次	贮存方式
缓冲液GA	15 ml	30 ml	室温
缓冲液GB	15 ml	30 ml	室温
去蛋白液GD(浓缩液)	18 ml	36ml	室温
漂洗液GW(浓缩液)	25 ml	25 ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	15ml	室温
蛋白酶K(20mg/ml)	1 ml	2×1 ml	-20℃
溶菌酶(5mg/ml)	1ml	2×1 ml	-20℃
RNase A(10mg/ml)	1ml	1 ml	-20℃
吸附柱CG	50个	100个	室温
收集管(2 ml)	50个	100个	室温
说明书	1份	1份

准备工作：
1、准备55℃和70℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。
2、按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液GW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3、每次使用前请检查缓冲液GA，缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

操作步骤：
如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、取细菌培养液1–2 ml，10,000 g离心1分钟，尽量吸净上清；向细菌沉淀中加入180μl EB，旋涡混匀后加入18μl 溶菌酶，室温放置10-15分钟，期间间歇混匀几次。
注：溶菌酶的用量和处理时间与处理的细菌种类密切相关，用户可以根据细菌种类进行调节。如革兰氏阳性菌应将处理时间延长到30-60分钟。
2、10000g离心1分钟，吸弃大部分上清，留下约10μl液体，彻底混匀。
注：由于余留的液体较少，彻底混匀菌体不太容易，用手指弹动管壁附加枪头反复吹打既能完全混匀菌体。混匀一定要彻底，否则容易导致步骤8中离心柱堵塞。
3、向菌体沉淀中加入200μl缓冲液GA，混匀。
4、向管中加入20μl 蛋白酶K，混匀，55℃处理15-30分钟，期间间歇混匀2-3次至溶液清亮。
注：加入蛋白酶K后会产生絮状物，消化彻底的标志是絮状物完全消失，溶液变清亮。如消化不彻底，会导致步骤8中离心柱堵塞。
5、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液，混匀后室温放置2分钟。
6、加入220μl缓冲液GB，混匀，70℃放置10-30分钟(对于革兰氏阳性菌，时间应延长到60分钟)。
注：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置相应时间后溶液会变清亮。如溶液未变清亮，应延长70℃处理时间。如果絮状物不能处理干净，容易导致步骤8中离心柱的堵塞。
7、加入220μl无水乙醇，充分混匀。
注：加入乙醇后会产生絮状沉淀，可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理，容易导致步骤8中离心柱的堵塞。
8、将上一步所得溶液和絮状沉淀加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，11000g离心5分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
注：如果出现吸附柱堵塞现象，可将离心时间延长到10分钟。
9、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11,000 g离心2分钟，倒掉废液，吸附柱放入收集管中。
10、向吸附柱CG中加入700μl漂洗液GW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11,000 g离心60秒，倒掉废液，吸附柱放入收集管中。
11、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液GW，11,000 g离心60秒，倒掉废液。
12、吸附柱CG放回收集管中，11,000 g离心2分钟。
注：此步骤非常重要，其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
13、将吸附柱CG转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，11,000 g离心2分钟。
注意：
a.洗脱缓冲液体积最好不少于50μl，体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
14、DNA产物-20℃保存。

DNA浓度及纯度检测：
基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0％琼脂糖凝胶，使用λ/HindIII判断基因组的大小，完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗脱，比值可能偏低，但并不表明DNA纯度不高。

储存条件：室温，有效期12个月。

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