SYA173型呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RS

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北京百奥莱博生产销*(代"售")的SYA173型呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)现货价格，是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

名称：SYA173型呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)现货价格
编号：SYA173
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
产地：北京

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·炭疽杆菌单重荧光PCR检测试剂盒(分别有检测Capa/Rob/PAG的试剂盒)
编号：SYA014
英文名称：Capa/Rob/PAG Fluorescent PCR detection kit
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介
本试剂盒用三对炭疽杆菌特异性引物(Cap/robB/pagA)，各结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对炭疽杆菌核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途
该试剂盒适用于检测皮肤水泡液、咽拭子、可疑食物等样本中的炭疽杆菌特异性核酸序列(pX01质粒-pagA基因；pX02质粒-cap基因；染色体-rpoB基因)进行扩增，用于炭疽杆菌感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
反应液(qPCR MIX) 1管 480μL/管
pagA荧光引物和探针 1管 240μL/管
Cap荧光引物和探针 1管 240μL/管
rpoB荧光引物和探针 1管 240μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、荧光PCR仪器适用范围
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
皮肤炭疽，取水泡液1mL；肺炭疽，采集咽拭子标本，放入标本采集管中；肠炭疽，取粪便1g。
6.2 样本前处理：
固体样本：手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中，液体样本：直接取上100μL于1.5mL灭菌离心管中。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)、引物及探针，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 10µL N×10µL
Cap或robB或pagA引物及探针 5µL N×5µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(PTC)：均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明核酸阴性。
(3) 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·禽马立克(MDV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA540
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·新布尼亚病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA249
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对新布尼亚病毒特异性引物，结合特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对新布尼亚病毒 RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中新布尼亚病毒的探针报告基团为FAM。

二、用途：
本试剂盒适用于新布尼亚病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
新布尼亚荧光qRT-PCR反应液 1管 960μL/管
酶混合物 1管 48μL/管
阴性对照 1管 250μL/管
阳性对照 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为12个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的处理与RNA提取
6.1 样品前处理
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.2g于研磨器中研磨，加入1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL 灭菌离心管中；液体样品，直接取100μL提取。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液、RT-PCR Reaction Buffer、酶混合物，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光SFTSV反应液 20µL N×20µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 21µL N×21µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照/阳性对照4μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 42℃ for 20 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
55℃ for 30 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值<35的样本为阳性，表明新布尼亚病毒核酸阳性。
（2） Ct值显示为无或Ct值≥38的样本为阴性样本，表明新布尼亚病毒核酸阴性。
（3） 如果35≤Ct值<38，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行新布尼亚病毒 qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明新布尼亚病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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