SYA465型轮状病毒荧光PCR检测试剂盒(ROV)多少钱

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括SYA465型轮状病毒荧光PCR检测试剂盒(ROV)多少钱在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：SYA465型轮状病毒荧光PCR检测试剂盒(ROV)多少钱
编号：SYA465
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
产地：北京

我公司的SYA465型轮状病毒荧光PCR检测试剂盒(ROV)多少钱，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·人细小病毒B19核酸检测试剂盒
编号：SYA774
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
人类细小病毒B19是英国科学家Cossart及其同事于1977年在筛查无症状乙肝患者血清时无意发现的，根据生化及分子生物学特点将其归为细小病毒科。由于其是在B组的第19号样品中发现的，故命名为B19病毒。最初人们认为B19是人群中普遍存在而不致病的一种病毒，但后来发现，B19感染是引起传染性红斑、慢性溶血性贫血患者发生再障危象、免疫抑制患者慢性贫血、孕期流产、死胎的病原体。
本试剂盒适用于检测人全血等标本中的人细小病毒(B19)DNA，适用于人细小病毒(B19)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。
【检验原理】
本试剂盒用一对人细小病毒B19特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对人细小病毒B19核酸进行体外扩增检测，用于对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
名称 数量 规格
核酸提取液 2管 1.5ml
酶液 1管 50μl
B19反应液 1管 1.0ml
B19阳性质控品 1管 50μl
阴性质控品 1管 250μl
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】
-20℃避光保存、运输、避免反复冻融，有效期12个月。
【适用仪器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【标本采集】
1. 适用标本类型：人全血；
2. 标本采集：
血液:无菌注射器抽取外周血1-2ml注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管；
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
【使用方法】
1. 样品处理(样本处理区)
1.1 样本前处理
取抗凝血下层(细胞层)50μl，加入200μl ddH2O使其胀破。
1.2 DNA提取
1) 取上述处理好的标本40μl，加入等体积核酸提取液，100℃恒温处理10分钟，13000 rpm离心5分钟，取上清液转移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2) DNA的提取也可以采用北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(离心柱提取法)，请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2. 试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1
管阴性对照+1管阳性对照)，每测试反应体系配制如下表：
试剂 B19 反应液 酶液
用量 20μl 1μl
3. 加样(样本处理区)
将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μl，加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
4. PCR扩增(核酸扩增区)
4.1 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；
4.2 推荐循环参数设置：
步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号
1 1 cycle 94℃ 2min 否
2 40 cycle 94℃ 15sec 否
55℃ 30sec 是
反应体系为25ul；荧光通道检测选择：FAM通道。
5. 结果分析判定
5.1 结果分析条件设定
1) 设置基线(baseline)：一般情况下，对ABI 7500、7700等仪器设为6-15cycle，对PE5700设为3-15cycle,对MJ Research Option2设为6-12cycle。特殊情况可对基线适当调整。
2) 设置阈值(threshold):以阈值线刚超过阴性对照扩增曲线(无规则的噪音线)的最高点。
5.2 结果判断
1) 阳性：检测样本Ct值小于等于35.0，且曲线有明显的指数增长期；
2) 可疑：检测样本Ct值大于35.0且小于40.0，重复一次实验，如果Ct值仍小于40.0，且曲线有明显的指数增长期，为阳性，否则为阴性；
3) 阴性：检测不到样本Ct值或Ct值为40。
6. 对检验结果的解析
实验室环境污染，试剂污染，标本交叉污染会出现假阳性结果；试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果。
7. 质控标准
1) 阴性质控品：扩增曲线无对数生长期或无Ct值显示；
2) 阳性质控品：扩增曲线有明显对数生长期，且Ct值≤32;
以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用10%次*酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·小肠耶尔森菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA024
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肉毒杆菌E型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA021
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副伤寒沙门杆菌单重荧光PCR检测试剂盒(有甲乙丙三型)
编号：SYA060
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛支原体抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA664
英文名称：Mycoplasma Bovis ELISA Antibody Test Kit
等级：科研实验专用
规格：96次/盒

【主要成分】
组份 数量 规格
包被板 1 块 96T
阴性血清对照 1 管 1ml/管
阳性血清对照 1 管 1ml/管
样品稀释液 1 瓶 50ml/瓶
10×洗液 1 瓶 30ml/瓶
兔抗牛IgG酶标抗体 1 瓶 12ml/瓶
底物显色液 1 瓶 12ml/瓶
终止液 1 瓶 6ml/瓶
说明书 1 份
【作用与用途】
适用于牛血清中牛支原体抗体的检测。
【用法与判定】
1、试剂准备
仔细阅读说明书，所有的试剂在使用前需放置于室温至少1小时，使试剂盒恢复到室温。
2、洗涤液的配制
取1 份10×洗液加入到9份双蒸水中，混匀。配好的液体，应在3天内用完。
3、稀释待检血清。用样品稀释液将待检血清做1∶160(VV)倍稀释(建议在1.5ml微量离心管中加入400μl 样品稀释液，吸取2.5μl 待检样品加入该管中充分混匀)。
4、操作步骤
4.1 加样
包被板上对照和待检样品添加如下所示。
4.2 孵育
将稀释好的样品加入包被板中，100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.3 洗涤
甩去孔内液体，用稀释好的洗涤液洗涤包被板，300μl/孔，振荡洗涤3次，拍干。

 

	1	2
3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
A	P	S1	S2	S3	S4
B	P
C	N
D	N
E
F
G
H

(注：“P”为阳性血清对照；“N”为阴性血清对照；S1、S2、S3、S4 为待检血清样品)
4.4 二抗孵育
向各孔中加入兔抗牛IgG 酶标抗体，100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.5 洗涤
方法同4.3。
4.6 显色
加入底物显色液，100μl/孔，置室温(15～25℃)下，避光孵育9分钟。
4.7 终止
加入终止液，50μl/孔，轻微震荡混合均匀。
4.8 读数
在加入终止液15分钟内，将包被板置于酶标仪中，用波长450nm(OD450)读数。
4.9 S/P值计算
按照以下计算公式，计算S/P值。

4.10 判定标准
4.10.1 试验结果有效的条件是：阳性血清对照OD450值均应≥0.8，阴性血清对照OD450 值均应＜0.1。
4.10.2 待检样品的S/P 值≥0.418时，判定为阳性；待检样品的S/P值＜0.418时，判定为阴性。
【注意事项】
(1)所有试剂在2～8℃条件下保存。
(2)贮存时，所有的板条一定要用封口膜密封，防止潮气对包被板的损伤。
(3)不要使底物溶液接触强光和氧化物。取出后，不得再加回瓶中。
(4)仔细阅读说明书。
(5)不要使用过期的成分或者不同批次试剂混合使用。
(6)稀释10×洗液时，如发现存在结晶，可置37℃下加热使其溶解后再使用。
(7)注意加样和洗涤过程，以确保试验的准确度，不能用嘴吸液。
(8)被检血清发生腐败时勿用于检测。
(9)检验用器皿必须清洁，操作过程避免与金属类器物接触。
(10)在加样时，应使各孔的加样时间差别小于5 分钟，以保证各孔反应时间一致。
(11)操作过程中使用手套，终止液是硫*(代"酸")，如接触，应用清水迅速冲洗接触部位。
【贮存与有效期】
2～8℃保存，有效期为9个月。



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·肠产毒性大肠杆菌(ETEC)耐热肠毒素(ST-est)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA091
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鼠伤寒沙门菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA061
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·恙虫病立克次体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA131
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对恙虫病立克次体特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对恙虫病立克次体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测全血等样本中的恙虫病立克次体，用于恙虫病立克次体感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
恙虫病立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
恙虫病立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50μL，加入100μL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明恙虫病立克次体核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明恙虫病立克次体核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行恙虫病立克次体qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明恙虫病立克次体核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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