Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)特价促销，产品信息：

类别：生化检测试剂盒

英文名：Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8

产品名	产品编号	包装规格
Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)	YT310	100次

编号：YT310

规格：100次

英文名：Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8

品牌：百奥莱博

产地：北京

本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或总SOD活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。

 

试剂盒组分：

SOD检测缓冲液———————70ml

WST-8———————————800μl

酶溶液———————————100μl

反应启动液(40X)——————60μl

Cu/Zn-SOD抑制剂A——————500μl

Cu/Zn-SOD抑制剂B——————500μl

 

超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化*(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。

 

目前有多种SOD活性测定法，其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差，易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到100%等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法，但细胞色素C其氧化活性高，易受样品中的还原剂干扰，另外该方法需要连续测定吸光度值，对于SOD的检测灵敏度比较低，并且不太适合大批量样本的检测。

 

目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图，WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。

 

基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO：xanthine oxidase。

 

WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时，最大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

 

本试剂盒的检测不受样品中过氧化*的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化*，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化*酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化*的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化*时，对于检测结果仍无显著影响。

 

哺乳动物编码3种SOD。在大部分组织中，含量最高的是定位在细胞浆中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表达在线粒体中，并且Mn-SOD是可以被诱导表达的。Mn-SOD在某些情况下也可以定位在细胞浆中。有些组织或体液中会含有第三种SOD，extracellular SOD，简称EC-SOD。EC-SOD也是一种Cu/Zn-SOD，和编码细胞浆Cu/Zn-SOD的基因相似性很高，但有所不同。综上所述，细胞或组织内共有两类SOD，即铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。这两种SOD酶活性的总量就是总SOD的酶活性。当用Cu/Zn-SOD的抑制剂抑制其酶活性时测定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此时同时测定总的SOD酶活性，就可以计算出Cu/Zn-SOD的酶活性。

 

KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性，也被大量用于测定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有剧毒，并且对Cu/Zn-SOD的抑制百分比达不到很接近100%。

 

本试剂盒采用了一种无毒的两步双重抑制Cu/Zn-SOD的方法，在避免使用有毒药品的情况下同时确保了对于Cu/Zn-SOD的抑制百分比达到高度接近100%，即对于Cu/Zn-SOD的抑制效果显著优于KCN或NaCN。使对于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的测定更加安全和准确。

 

注意事项：

1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。

2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。

3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色，如果设置了使用说明中的空白对照3，就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。

4. Cu/Zn-SOD抑制剂A对人体有刺激性，使用时请注意适当防护。

 

储存条件：-20℃，有效期6个月。

Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)特价促销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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编号	类别	名称
YT410	工具酶	SP6 RNA聚合酶
YT742	一抗	兔抗MMP2抗体
YT647	一抗	Bak抗体
YT777	一抗	FoxO4抗体
YT875	免疫检测	封闭液(用TBS配置，含吐温20)
YT481	克隆与表达	N端His标签融合蛋白质粒
YT924	抑制剂激活剂	PARP1抑制剂(AG14361)
YT609	蛋白质研究	RIPA裂解液(强)
YT110	免疫检测	Alexa Fluor350抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
YT080	免疫检测	改进型柠檬酸*抗原修复液(50X)
YT539	酶和辅酶	L-乳酸脱*酶
YT195	凝胶迁移EMSA	生物素标记AP1凝胶迁移探针(0.2μM)
YT730	一抗	兔抗IKKα抗体
YT794	一抗	HDAC5抗体
YT034	蛋白质研究	蛋白浓度测定试剂盒(Bradford法)
YT929	抑制剂激活剂	微管聚合抑制剂(CYT997)
YT339	抑制剂激活剂	sGC抑制剂(NS-2028)
YT021	核酸电泳和回收	DNA Ladder(100bp-10kb)(21条带)(DNA分子量标准)
YT278	抑制剂激活剂	iNOS抑制剂(1400W)(诱导型一氧化*(代"氮")合成酶抑制剂)
YT163	其他培养基	多聚L-赖*酸溶液
YT268	凝胶迁移EMSA	EMSA定制探针(1.75μM)
YT361	生化检测试剂盒	ATP检测试剂盒
YT782	一抗	GSK-3β抗体

 

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