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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
558
- 英文名:
β-Catenin/TCF Probe For EMSA(1.75μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
β-Catenin/TCF consensus oligo的序列如下:
5"-CCC TTT GAT CTT ACC-3"
3"-GGG AAA CTA GAA TGG-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验7.5, 150 mM NaCl, and1% (v/v) Triton X-100. 7. Suitable SDS-PAGE and transfer setup as in Section 2.4.1 . 8. Protein Sample Loading Dye (4×) as in Section 2.4.1 . 9. Nitrocellulose or PVDF membrane. 10. Mouse anti-β-catenin antibody (available
v468. chapter 4 WNT 细胞通路 检测细胞GSK3活性与表达水平
andquantified ratios of phosphorylation relative to total proteinare provided. Figure 4.1b shows analysis of the same celllysates using phospho-β-catenin and p-CRMP2, two establishedtargets of GSK3. Note that only the phosphorylationof β-catenin is reduced
DNA;②2μl六聚核苷混合物(试剂5);③2μl dNTP混合物(试剂6),加入蒸馏水使总体积达到19μl,再加入1μl Klenow聚合酶。3、离心片刻后,将离心管置37℃恒温箱内孵育60min。延长孵育时间可长达20 h,可使标记量增加。4、加入2μl 0.2mol/L EDTA (pH8.0 )终止酶反应。5、加入2.5μl 4mol/L LiCl和75μl 预冷(-20℃)的乙醇,混匀置-70℃30 min或-20℃2h,使标记探针沉淀。6、离心(16500r/min),弃
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