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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
275
- 英文名:
β-Catenin/TCF Mutation Probe For EMSA(10μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
β-Catenin/TCF consensus oligo的序列如下:
5"-CCC TTT GAT CTT ACC-3"
3"-GGG AAA CTA GAA TGG-5"
EMSA突变探针-β-Catenin/TCF中β-Catenin/TCF的公认的结合位点发生了突变,从而使β-Catenin/TCF无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和β-Catenin/TCF的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和β-Catenin/TCF的结合的条带不会被抑制。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验浅析染色质免疫沉淀(ChIP)技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性
Tcf-4 直接参与到 enhance E 的调控中。此结果与 Hatzis 等人 [25] 对直肠癌细胞系 LS174T 做的 ChIP-CHIP 测得的结果一致,证实了一直以来研究者关于 myc 存在远端增强子的猜测。类似地,有研究表明 β-catenin 与 FGF2 相互作用,影响神经干细胞增殖或分化,然而具体如何协同调控增殖或分化进程尚未知,直到 Israsena 等人[10]用 ChIP 试验证明了 β-catenin 仅在 FGF2 存在时与 neurogenin 启动子直接结合
7.5, 150 mM NaCl, and1% (v/v) Triton X-100. 7. Suitable SDS-PAGE and transfer setup as in Section 2.4.1 . 8. Protein Sample Loading Dye (4×) as in Section 2.4.1 . 9. Nitrocellulose or PVDF membrane. 10. Mouse anti-β-catenin antibody (available
at 10, 25, and 50 μM). At 24 h post-treatment, celllysates were obtained; SDS-PAGE and Western blotting were performed as described in Section 3, Methods. AR-A014418dose-dependent decreases of phospho-β-catenin (Ser33/37) and phospho-glycogen synthase
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