北京荧光素(FITC)标记亲和素厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京荧光素(FITC)标记亲和素厂商，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京荧光素(FITC)标记亲和素厂商
编号：BTN131088
规格：5mg
英文名：FITC-Avidin
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品为荧光基团标记的亲和素。激发波长/发射波490nm/520nm，无游离荧光素。应用于荧光激活细胞分选和组织化学染色等领域。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

除北京荧光素(FITC)标记亲和素厂商外，我公司正在打折促销以下产品：

·PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
编号：BTN90604C
英文名称：PCR DNA Labeling Kit(Digoxin)
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

 

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。


北京荧光素(FITC)标记亲和素厂商关键词：BTN131088,荧光素(FITC)标记亲和素,FITC-Avidin

WE0250 Rosetta(DE3)感受态细胞 Rosetta(DE3)Competent Cell
SV0743 StyI-HF限制性内切酶 StyI-HF Restriction Endonuclease
SY0587 糖原PAS染色试剂盒 Glycogen (PAS) Stain kit
BTN140645 大肠杆菌TB1感受态细胞 E.coli TB1 Rosetta Competent Cell
YT262 STAT5凝胶迁移突变探针(10μM) STAT5 Mutation Probe For EMSA(10μM)
SV1477 表达 lq E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )
BTN80203 PAGE胶miRNA柱式回收试剂盒 miRNA column recovery kit for PAGE gel
Glycosylase"
YT917 TLR4激活剂(超纯LPS) Ultrapure LPS
HR0131 植物核蛋白/细胞器蛋白提取试剂盒 Plant nuclear protein/organelle Protein Extraction Kit
BTN130540 二*异香豆素溶液(10mg/mL) Dichloroisocoumarin Solution
SV0049 ApaLI限制性内切酶 ApaLI Restriction Endonuclease
SY0325 全能核酸酶 Benzonase Nuclease
北京荧光素(FITC)标记亲和素厂商关键词：BTN131088,荧光素(FITC)标记亲和素,FITC-Avidin


·DNA碱性胶上样液
编号：BTN101222
英文名称：DNAload for Alkaline Gel
规格：1.5mL
本品是6×的DNA碱变性琼脂糖电泳上样液，含有碱溶液、助沉剂、染料等成分。

产品特点：
1. 即开即用，不需要制备各种溶液。
2. 使用简单，电泳时，先将DNA样品与本上样液1：5混合即可直接上样。
3.还可以用于DNA碱变性琼脂糖电泳。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

·多聚甲醛-*氧化*固定液
编号：BTN131283
英文名称：Polyoxymethylene NaOH Fixative Solution
规格：250mL
本产品为甲醛、磷酸二**、*氧化*混合液，pH为7.2-7.4。本固定液适用于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时最好加入少量新鲜配制的戊二醛。该固定液条件温和，组织固定于该液中，4℃保存数月，仍可获得满意的染色效果。0-4℃条件下固定时间为15分钟-2小时。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·重组蛋白G
编号：BTN131080
英文名称：Streptococci protein G
规格：1mg
本品为重组蛋白G，纯度＞90%，带His标签，分子量10kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·植物DNA提取试剂盒(百万碱基级)
编号：BTN130939
英文名称：Plant DNA extraction kit(millions of base)
规格：10次
本品为重组蛋白G，纯度＞90%，带His标签，分子量10kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·Tth核酸内切酶IV
编号：BTN131228
英文名称：Tth Endonuclease IV
规格：500U
Tth核酸内切酶IV是一种热稳定的脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶。该酶切割AP位点5´端的第一个磷酸二酯键，产生3´羟基和5´脱氧核糖磷酸末端。该酶也具有

3´二酯酶活性。Tth核酸内切酶IV主要用于碱洗脱和碱解旋等用途。

活性定义：1单位指在10μl缓冲液体系中，65℃条件下，1小时内能够切割1pmol含一个AP位点*的60bp寡核苷酸双链所需要的酶量。

AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的60bp寡核苷酸双链2分钟。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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