相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
443
- 英文名:
T7 Endonuclease Ⅰ
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京T7核酸内切酶I报价的品牌:百奥莱博,是优质的工具酶产品,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多T7核酸内切酶I等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京T7核酸内切酶I报价
编号:BTN130635
规格:250U
英文名:T7 Endonuclease Ⅰ
品牌:百奥莱博
产地:北京
T7核酸内切酶I识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5´端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。其反应原理图如下:

产品用途:
1.识别错配DNA。
2.分解四方向交叉DNA或分支DNA。
3.检测或切割异源二聚体DNA和切刻DNA。
4.随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 核酸内切酶I,10000U/mL | 25μl |
| 10×反应缓冲液 | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在 50μL反应体系,37℃条件下,1小时将90%以上的1μg超螺旋十字型结构的pUC(AT)转化成90%以上的线性结构所需要的酶量。
* pUC(AT)来自 pUC19,在其 EcoRI和PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。
实验步骤举例(使用T7核酸内切酶I消化PCR产物确定基因打靶效率):
1.在一个塑料离心管中,按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 |
| PCR产物 | 200ng |
| 10×反应缓冲液 | 2μl |
| 超纯水 | 补水到19μl |
2.取上步溶液,在PCR 仪内进行如下操作:
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 初步变性 | 95℃ | 5min |
| Annealing | 95-85℃ | -2℃/second |
| 85-25℃ | -0.1℃/second | |
| Hold | 4℃ |
3.添加T7核酸内切酶I至退火后的PCR产物(20μL体系):
| 成分 | 加入量 |
| PCR产物 | 19μl |
| T7 核酸内切酶I | 1μl |
4.37℃保温15分钟。
5.添加1.5μL 0.25M EDTA终止反应。
备注:
T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。
我公司的北京T7核酸内切酶I报价,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·红细胞裂解液A型(核酸纯化)
编号:BTN60403
英文名称:Red Cell Lysis Solution,Type A
规格:250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不含DNA和RNA,其所含血红素能抑制PCR反应,所以先用本产品裂解红细胞,再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。
产品特点:
1.快速,一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/*仿去蛋白质。
2.高效,一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞,一般样品最多只需要处理两次。
3.扩容性好,可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好,可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在装有抗凝血液的离心管中,按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟,小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中,轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞,可以直接用于后续的实验。
北京T7核酸内切酶I报价关键词:T7 Endonuclease Ⅰ,T7核酸内切酶I,BTN130635
·木瓜蛋白酶抑制剂溶液(0.5mg/mL)
编号:BTN130533
英文名称:Papain Inhibitor Solution
规格:10mL
本产品为木瓜蛋白酶抑制剂水溶液,浓度为0.5mg/mL,工作浓度为50μg/mL。木瓜蛋白酶抑制剂可以抑制木瓜蛋白酶(papain)、胰蛋白酶(trypsin)和血浆酶(plasmin)等蛋白酶活性,抑制能力是弹性蛋白酶抑制剂的100倍。木瓜蛋白酶抑制剂的分子量为677.63,易溶于水。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
使用方法:
将本产品加到各种裂解液中,使其终浓度为50μg/mL即可。含有本产品的水溶液或缓冲液在2-8℃下可以稳定1周,-20℃条件下大约可稳定1个月。注意避免将产品反复冻融。低浓度的本产品稀释液应置于冰上,且只能保存1天。
具体使用含本产品的裂解液的方法,根据裂解液的不同而不同,本说明书无法提供详细流程。
技术资料:
抗蛋白酶一般是从微生物菌种(如链霉菌,放线菌等)中分离得到的,在细胞转化过程中可被用于验证蛋白酶的作用。抗蛋白酶作为一种普遍的生物活性肽,也被用于细胞信号的研究和新提纯的蛋白酶的鉴定。
木瓜蛋白酶抑制剂的分子式是:C27H44N10O6•2HCl。它不仅易溶于水,还易溶于甲醇和DMSO,微溶于乙醇、丁醇和丙醇,不溶于*、己烷和*仿。
·亲和素
编号:BTN131085
英文名称:Avidin
规格:10mg
本产品为母鸡卵清糖蛋白冻干粉末,亲和纯化,脱盐处理。它结合能力为11-15μg生物素/mg亲和素,等电点10~10.5,在很宽的pH和温度范围稳定。
产品应用:
➤作为与生物素化的酶结合或用于标记酶的免疫分析试剂。
➤作为富含生物素组织切片的封闭蛋白(使用0.1%来抑制内源生物素)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京T7核酸内切酶I报价关键词:T7 Endonuclease Ⅰ,T7核酸内切酶I,BTN130635
·柱式动物DNA提取试剂盒
编号:BTN71206
英文名称:Animal DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在我司动物DNA提取试剂盒的基础上改良而得的柱式升级产品,主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。
产品特点:
1. DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
2. DNA产率一般在200μg/g左右(跟组织种类密切相关)。
3.可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
4. 操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
6. 性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 20ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存、有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 根据使用材料的不同进行下列操作:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。如果是fibroblasts或carcinoma细胞,0.8mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜或冷冻的组织:先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加0.8mL预热的溶液A,用剪切式匀浆器匀浆30秒左右,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg。
d)对DNAhold保存组织:先用纸吸去DNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2. 加入0.4mL预热的溶液B到裂解液中。由于溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加0.4 g。加入溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
3. 65℃水浴5-10分钟。如果室温放置,DNA产量将降低10-20%。
4. 加入0.2mL自备*仿,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5. 12000~15000g室温离心2分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
6.小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
7. 每个管中加入1.5倍体积的溶液C,充分颠倒混匀。
8. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
9. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
11. 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
12.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
13. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置离心吸附柱1-2分钟。
14. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
我公司正在火爆促销工具酶系列产品,欢迎您的垂询选购北京T7核酸内切酶I报价。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验限制和修饰现象在上个世纪中期被人们所发现,到 2005年1月,已经发现4342 种限制酶和甲基化酶,其中限制酶有3681 种。限制性内切酶有特定的识别位点和切割位点,切割后可产生平末端或粘性末端。酶切有标准的反应体系,受末端长度的影响,有位点偏爱性,在极端非标准条件下会产生星星活性。通过酶切连接可以增减酶切位点,酶切位点在基因组中的分布是不均匀的。大肠杆菌有三种甲基化酶和三种依赖于甲基化的限制系统。甲基化对限制酶切影响。基因操作常用的 DNA 聚合酶有大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ,T4、T7
。DNA 的一级结构不稳定,会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶,如果核酸酶处理不干净,残留在纯化的核酸样本中,从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶,在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用,很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶
形DNA结构、Holliday结构等,故易出现假阳性;测序耗时长(1-3天),常常出现测序无信号等问题。 今年年初,Genloci通过植物基因工程表达产生高纯度的Cruiser™酶,它是一种具天然强活性的核酸内切酶,与CelⅠ同源。该酶能够高效特异地识别异源双链DNA的突变位点,并从突变位点的3’-端高效地切割异源双链DNA,不会出现假阳性。 今年6月,Genloci推出Cruiser™基因敲除检测试剂盒,该试剂盒可广泛应用于精确检测人、哺乳动物、细菌、真菌、病毒以及植物基因的敲除,尤其适用于ZFN
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









