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722
- 英文名:
T4 Endonuclease V
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一年
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京T4核酸内切酶V现货价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京T4核酸内切酶V现货价格
编号:BTN130641
规格:2000U
英文名:T4 Endonuclease V
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品既有DNA糖基化酶活性,又有AP裂解酶活性。16KD的蛋白质可识别因紫外线照射引起的cis-syn型环丁烷嘧啶二聚体。该酶在嘧啶二聚体的5´端切割糖苷键,同时其内切酶活性切割AP位点上的磷酸二酯键。
产品用途:
1.DNA 损伤研究;
2.单细胞凝胶电泳(彗星实验)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指20μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内使超过95%的0.5μg经紫外线照射诱变的超螺旋pUC19 DNA变成切刻型质粒的酶量。
注意事项:温育时间应不超过30分钟,以取得最佳使用效果。
欲咨询购买北京T4核酸内切酶V现货价格,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·茜素红S染色试剂盒
编号:BTN121105
英文名称:Alizarin Red S Staining Kit
规格:100mL
茜素红S染色试剂中的茜素红S可通过与*离子和其他金属离子发生鳌和反应而形成可以在显微镜下直接观察的带颜色的复合物。本产品就是基于此原理而开发。
产品特点:
1.即开即用,用户不需要单独准备各种溶液。
2.操作简捷,性能稳定,显色清晰。
3.可用于组织切片中的*沉积,尤其适用于骨细胞或组织的病理和生理研究。
4.可用于检测动物原生代或培养细胞的*沉积。
5.本产品为通用型,不但用于*离子的检测,还可用于FeCl2和CdCl2的检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 茜素红S染色 | 100ml |
| 茜素红S pH调节液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
注意:试剂具有腐蚀性,操作时须带手套。实验时可以用含金属离子的切片或培养细胞作为阳性对照。可溶性蛋白会干扰茜素红S与*的相互作用,所以样品必须经过固定处理(以去除细胞中的可溶性蛋白)。对培养细胞,还必须洗涤去掉培养基(含血清等蛋白成分)。茜素红S与*的螯合反应需要在水相发生,因此加入茜素红S 前最好用水溶液洗涤掉前面操作所残留的有机溶剂。
一、茜素红S染色液的准备
1、根据所需检查的金属离子按下表选择茜素红S染色液的最佳pH。
| 金属离子 | 最佳PH | 呈现的颜色 |
| CaCl2,CaPO4、CaCO3 | 4.28-6.75 | 橙红 |
| FeCl2 | 5.62-8.05 | 深紫 |
| CdCl2 | 5.11-5.78 | 品红 |
2.用茜素红S pH调节液将茜素红S染色液调到所需的pH值。
二、染色载片上细胞
3.用缓冲中性福尔马林、福尔马林-乙醇混合液或乙醇作为固定剂固定铺在载玻片上的细胞(本试剂盒不提供上述固定剂)。
4.将细胞放入95%乙醇中处理。
5.将载玻片在空气中干燥。
6.将载玻片放在装有茜素红S染色液的染色缸中染色1-5分钟。注意:此步需要密切控制,最好每隔一分钟放在显微镜下检测,最佳时间随样品中盐离子的多少不同而不同。
7.用蒸馏水洗涤载片一次。
8.用丙*(代"酮")浸泡载波片30秒。
9.用丙*(代"酮")-二甲*混合液(50:50)浸泡浸泡载波片15秒。
10.肉眼可见红色或紫色(取决于所检查的离子)即可终止染色,放光学显微镜观察。*沉积阳性细胞将呈现桔红色。
三、染色石蜡包埋切片
11.按常规方法进行固定、包埋、切片、脱蜡和水化等操作,直到70%乙醇处理这步。注意:固定剂最好使用4%的副甲醛或10%福尔马林,切片厚度最好在0.4μm。
12.将切片浸入蒸馏水中。
13.将切片浸泡在茜素红S染色液中30秒-5分钟,具体时间以肉眼或显微镜下可见桔红色斑点为准。
14.用滤纸吸尽染色液后浸入丙*(代"酮")20次。
15.再进入丙*(代"酮")-二甲*混合液(50:50)20次。
16.最后用二甲*处理并用封固剂封片。
四:染色细胞培养(最好是26或6孔培养板培养的细胞,便于在显微镜下观察)
17.小心抽去培养液,注意不要吸走细胞。
18.沿壁上缓慢加入1-2mL自备的1×PBS或HBSS缓冲液,然后再小心将加入的液体吸出。
19.每孔中加入自备的无水乙醇直到全部覆盖细胞,室温放置30分钟后小心移弃无水乙醇,室温晾干。此步用于固定细胞。也可用10%甲醛代替无水乙醇,但固定时间只需要15分钟,同时还需要用蒸馏水洗涤3次才能进入下一步。每次洗涤时,先加入蒸馏水,再浸泡5-10分钟,然后小心吸走蒸馏水。注意:操作时不要破坏细胞单层。
20.每个细胞培养孔中加入1mL 茜素红S染色液,在室温下孵育至少20分钟,最后小心吸走茜素红S染色液。
21.加入1mL蒸馏水,然后小心吸走蒸馏水。此为洗涤步骤。注意:洗涤一定不要震荡以避免形成的*沉积物脱落。
22.重复上步操作3次(共洗涤4次)。
23.样品可立即用于显微镜检测。有*沉积的细胞将呈现桔红色。
北京T4核酸内切酶V现货价格关键词:T4 Endonuclease V,BTN130641,T4核酸内切酶V
·LAMP扩增阳性对照
编号:BTN130923
英文名称:LAMP Positive Control
规格:50次
本产品为LAMP扩增专用的阳性对照,用于判断、分析LAMP等温扩增结果。LAMP等温扩增,即Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增),是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 对照模板DNA | 50μl |
| 对照引物混合物 | 200μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在冰上溶解除酶外的各种组份,其中LAMP Mix(2×)、MgCl2(25mM)和Bst DNA聚合酶(8U/μL)等试剂自备(参照本公司产品100203组分),混匀,稍离心。在反应管中加入以下组份:
| 成份 | 阴性对照管 | 阳性对照管 |
| LAMP Mix(2×) | 10μl | 10μl |
| 对照引物混合物 | 4.0μl | 4.0μl |
| 对照模板DNA | 不加 | 1μl |
| MgCl2(25mM) | 3μl | 3μl |
| Bst DNA聚合酶(8U/μL) | 1.5μl | 1.5μl |
| 水 | 1.5μl | 0.5μl |
2. 混匀,置于60-65℃保温120分钟。
3. 80℃下保温10分钟灭活Bst DNA聚合酶。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL,1-2%的琼脂糖凝胶电泳,可见LAMP特征性电泳图谱;
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL,混匀,稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中,紫外灯下可见绿色荧光产生;
c)荧光定量检测。
北京T4核酸内切酶V现货价格关键词:T4 Endonuclease V,BTN130641,T4核酸内切酶V
SV0645 SacI限制性内切酶 SacI Restriction Endonuclease
SY0553 细胞膜可渗透*离子荧光探针 Fura-2, AM, Cell Permeant
BTN90407A λDNA Lambda DNA
YT229 NF-κB凝胶迁移探针(10μM) NF-κB Probe For EMSA(10μM)
SV1432 Amylose 树脂
BTN70503T DNA marker(250-15000bp) DNA ladder(250-15000bp)
BTN100937 phi29 DNA聚合酶 φ29 DNA Polymerase
YT882 蛋白G琼脂糖 Protein G Agarose
HR0067 革兰氏阳性菌蛋白提取试剂盒 Gram positive bacterial protein extraction kit
BTN80816 超敏型BCA法蛋白定量试剂盒 Hypersensitive BCA Protein Assay Kit
RFT187 胰酶细胞消化液 Trypsin-EDTA Solution
SY0293 逆转录酶 M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
KFS065 一抗稀释液(Western Blot) Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer
WE0321 一抗稀释液(WB IHC) Antibody Diluent
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文献和实验,例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等,常用的载体一般为质粒;根据需要可直接从公司购买合适的载体,也可以自己构建。(3)连接:目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体,使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同,产生三种连接方式:粘端连接、平端连接和不相配的连接。(4)转化:将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞,使其在宿主细胞内复制扩增或表达,赋予宿主细胞新的生物特征。(5)克隆化:重组 DNA 分子转化大肠杆菌后,在平板
限制和修饰现象在上个世纪中期被人们所发现,到 2005年1月,已经发现4342 种限制酶和甲基化酶,其中限制酶有3681 种。限制性内切酶有特定的识别位点和切割位点,切割后可产生平末端或粘性末端。酶切有标准的反应体系,受末端长度的影响,有位点偏爱性,在极端非标准条件下会产生星星活性。通过酶切连接可以增减酶切位点,酶切位点在基因组中的分布是不均匀的。大肠杆菌有三种甲基化酶和三种依赖于甲基化的限制系统。甲基化对限制酶切影响。基因操作常用的 DNA 聚合酶有大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ,T4、T
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液: 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意:ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP,连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚
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