北京盐酸四环素溶液厂家

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京盐*(代"酸")四环素溶液厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京盐*(代"酸")四环素溶液厂家
编号：BTN60209
规格：10mL
英文名：Tetracycline HCl Solution
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品是浓度为50mg/mL的四环素(硫*(代"酸")盐)溶液，可以加入到细菌液体或固体培养基中培养含四环素抗性基因的细菌。四环素盐*(代"酸")盐的水溶性好，生物利用度比四环素碱好，故常用于临床及研究领域。

作用原理：主要是与细菌核糖体30S亚单位的A位特异性结合，阻止tRNA在该位置上的联结，阻止肽链延伸，从而抑制细菌蛋白质合成。四环素类还可引起细胞膜通透性改变，使重要成分外漏，从而抑制细菌生长繁殖。

抗性机制：抗性基因tet特异表达一种长度为399aa的膜结合蛋白，可将四环素分子从细胞内转移到细胞外，从而使细胞免去被四环素伤害。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期6个月。

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BTN130663 T4噬菌体基因32蛋白 T4 Gene 32 Protein
SY0052 腺苷三磷酸溶液(100 mM)(ATP) ATP Solution(100 mM)
HR0289 蛋白酶抑制剂混合物(含EDTA) Protease inhibitor mixture(with EDTA)
KFS374 NAD+/NADH荧光检测试剂盒
SV0255 BstEII-HF限制性内切酶 BstEII-HF Restriction Endonuclease
SY0414 27mm透析袋(透析分子量25kDa) Dialysis Tube MD34 (Mw25,000)
BTN90603A 随机引物法DNA探针标记试剂盒 Random Primer DNA Labeling Kit
YT093 Kisser封片液(不含*酚) Kisser’s Mounting Medium, phenol free
SV1120 Tth 核酸内切酶 IV Tth nucleic acid enzyme IV
BTN111201 痰液DNA提取试剂盒 Sputum DNA extraction kit
BTN100908B 一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD) One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(B)
YT457 IL-6启动子荧光素酶报告基因质粒(白介素6启动子质粒) IL-6-promoter-luc Reporter gene plasmid
ALH133 细菌基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附) Bacterial genomic DNA Rapid Extraction Kit(adsorption column)
北京盐*(代"酸")四环素溶液厂家关键词：BTN60209,Tetracycline HCl Solution,盐*(代"酸")四环素溶液

SY0156 STAT1-GFP报告基因质粒 STAT1 GFP Reporter Plasmid
HR0463 细胞衰老检测试剂盒 Cell senescence assay kit
WE0185 血块基因组DNA提取试剂盒 BloodClot Blood DNA Extraction Kit
SV0550 NmeAIII限制性内切酶 NmeAIII Restriction Endonuclease
SY0515 小鼠纤连蛋白 Mouse Fibronectin
KFS278 5-*脲嘧啶(5-Fluorouracil) 5-Fluorouracil
YT196 AP1凝胶迁移突变探针(1.75μM) AP1 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
SV1384 T4 RNA 连接酶 2，截短型
BTN100816 碱性胶电泳液 10×Alkaline Gel Buffer
WE0396 游离DNA样本保存管(5ml) Cell-Free DNA Storage Tube(5ml)
YT607 谷胱甘肽合成酶2 Glutathione Synthase 2 (Crude Enzyme)
HR0001 总蛋白提取试剂盒 Total protein extraction kit
BTN81218 植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用) Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE)
RFT105 Oligo(dT)18 Primer
SY0260 双链DNA定量检测试剂盒 Picogreen dsDNA Assay Kit
KFS033 即用型免疫组织化学SP试剂盒(Rabbit)
BTN131021 链霉亲和素 Streptavidin
SV0827 CutSmart Buffer（10X）
SY0626 草甘膦(甘草磷)(95%) Glyphosate
KFS379 活性氧ROS荧光探针 DHR123
北京盐*(代"酸")四环素溶液厂家关键词：BTN60209,Tetracycline HCl Solution,盐*(代"酸")四环素溶液


·一站式GST标记蛋白质微量纯化套装
编号：BTN111116A
英文名称：One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack(A)
规格：20次
重组蛋白N端的GST谷胱甘肽S转移酶能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，其原理如下：


产品特点：
1．一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达GST 标记蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可，非常方便。
2．专一性强，一次过柱即可获得纯度高达95%的GST-标记蛋白。
3．只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的GST 标记蛋白。
4．每次可以处理20mL的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5．提供4mL浓度为50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附5-10mg GST 标记蛋白质。
6．本介质可以反复使用多次。

试剂盒组成：

 

成分	20次(A)	20次(B)
谷胱甘肽-Agarose介质,50%	4ml	4ml
10×PBS缓冲液	100ml	100ml
溶液A	1ml	无
GST洗脱缓冲液成分一	25ml	25ml
GST洗脱缓冲液成分二	约80mg	约80mg
溶菌酶(20KU/mg)	无	30mg
Benzonase(2U/μL)	无	20μl
PMSF(10mg/mL)	0.5ml	0.5ml
6mL层析柱(带筛板)	1套	1套
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输和保存，溶菌酶、Benzonase和PMSF 需低温运输。收到货后，介质需4℃保存，溶菌酶、Benzonase和PMSF 需-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：
1．每步得到的样品最好都留存少量作为SDS-PAGE分析的对照，在下面描述中就不再提醒。
2．本实验需要用到的1×PBS缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供的10×PBS缓冲液而得。PBS缓冲液用超纯水稀释后极其容易长细菌，注意防止污染。
3．GST 洗脱液的配制方法是将约80mg GST 洗脱液成分二干粉全部加入到GST 洗脱液成分一溶液中，摇晃直到干粉全部溶解即得GST 洗脱液，分装成小份放-20℃保存，每次用一管。

一、重组蛋白的表达和细菌收集
1．37℃振荡培养20mL含表达质粒的细菌到OD600=0.6-0.8。
2．加IPTG 到终浓度为0.1mM，30℃振荡培养3小时或22℃振荡培养8小时(或过夜)。
3．4℃ 5000g离心10分钟收集20mL表达菌液，弃上清。
4．用1×PBS缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000g离心10分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

二、细胞裂解
5．如果用本产品A型，用1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(1mL 1×PBS缓冲液+50μl溶液A+ 25μl 10mg/mL的PMSF溶液)重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选1K-10K 频率处理15次，每次20秒，间隔1分钟(必需放置在冰上)。裂解物不能粘稠，否则会堵塞层析柱。
6．如果用本产品B型，在1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(在20mL 1×PBS缓冲液中加入所有30mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成1mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置)中加入25μl 10mg/mL的PMSF溶液和1μl Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置30分钟，得到细菌裂解物。
7．将超声或酶法细胞裂解物在13000 g 4℃离心10分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性GST 标记蛋白。

三、层析柱的制备和GST蛋白纯化
8．摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据GST蛋白产量决定，100mL菌液一般使用200μL介质即可)。下列步骤各溶液的用量均针对200μL介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9．用5mL预冷的1×PBS缓冲液洗柱。
10．将第7 步得到的上清液(含可溶性GST标记蛋白)上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于SDS-PAGE电泳。GST和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在0.2-1mL/分钟即可。如要提高GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11．用0.5-2mL 1×PBS缓冲液洗柱，收集并保存穿透液(含杂蛋白)。
12．用0.2-1mL GST洗脱液洗柱，收集并保存穿透液(含GST 标记蛋白)。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在4℃放置，需立即用于后续处理(如浓度测定或SDS-PAGE电泳)或-80℃长期放置。
13．对收集的2种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或SDS-PAGE分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用Bradford法或OD 检测法(1 OD280 约等于0.5mg/mL蛋白)测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于GST的分子量为26 KD，所以在SDS-PAGE胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大26 KD。

附：GST柱的恢复(本试剂盒不含所需试剂)
1．用3倍体积的6M盐*(代"酸")胍处理柱子10分钟。
2．用3倍体积的超纯水处理柱子10分钟。
3．用3倍体积的缓冲液一(0.5M NaCl，0.1M Tris·HCl，pH8.5)处理柱子10分钟。
4．用3倍体积的缓冲液二(0.5M NaCl，0.1M Tris·HCl，pH4.5)处理柱子10分钟。
5．再重复3-4 步两次。
6．用3倍体积的超纯水处理柱子3次。
7．用3倍体积的1×PBS缓冲液处理柱子2次。
8．堵上漏口，加3倍体积的1×PBS缓冲液待用。若长时间不用，则第7步和第8步的1×PBS改成20%的乙醇。

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