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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
601
- 英文名:
Zetterqvist Fixative Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Zetterqvist固定液怎么卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货Zetterqvist固定液怎么卖
编号:BTN131280
规格:250mL
英文名:Zetterqvist Fixative Solution
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品为常用固定液,主要成分为巴比*(代"妥")*、乙酸*等。此固定液是活检及动物实验较好的固定液,固定效果较单纯甲醛更好。固定时间一般15分钟-1小时为宜。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
我公司的北京现货Zetterqvist固定液怎么卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·冷冻型血液RNA保存液
编号:BTN130969
英文名称:Blood RNA freezing preservation solution
规格:100mL
·链霉亲和素磁珠
编号:BTN130521
英文名称:Magnetic beads binding with streptavidin
规格:2mL
本产品是由磁性纳米颗粒与高纯度的链霉亲和素共价偶联而成。这种微球能用于捕获生物素标记的底物,如抗原、抗体和核酸等。链霉亲和素(streptavidin)与生物素(biotin)的结合是最著名的非共价生物交互作用之一,因此,这也是亲和层析法所使用的一种强大工具。生物分子可以与生物素轻松融合,而层析基质上固定的链霉亲和素配体可以与之结合,而且这种链霉亲和素-生物素相互作用具有较低的非特异亲和性,捕获所需的底物能够直接应用于后续实验。本产品可广泛应用于免疫学检测、核酸纯化、核酸固相杂交检测、细胞分选等分子生物学实验。
产品特点:
1. 对于生物素化样品的捕获、漂洗及检测等流程操作更加简便。
2. 体系经过优化,更易于大规模、多样品、自动化操作。
3. 磁珠浓度:1%磁珠含量;
固相载体:超顺磁性硅基磁珠;
磁珠粒径:1μm;
pH耐受范围:2-9。
4. 载样量(每毫克磁珠):﹥3000pmol游离生物素;﹥450pmol生物素标记的单链寡核苷酸;﹥20μg生物素化IgG。
5.缓冲液:10mM PBS,0.1% BSA,0.05% sodiu*(代"m") azide,0.1% Tween20。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 取适量磁珠(推荐每次取30μL-50μL 磁珠混悬液,用户可根据样品种类及需求调整使用量)于干净离心管中,通过磁力架磁分离后弃上清。
注:磁珠使用前请使用上样缓冲液淋洗磁珠3-5次,以保证磁珠的使用效果。
2. 加入待反应样品,室温振荡反应10-30分钟后(反应时间根据生物素化分子的大小及空间结构的复杂性可适当延长),置于磁力架上进行磁分离,弃上清,并用上样缓冲液重复淋洗3次。
3. 链霉亲和素和生物素的结合非常迅速,且结合后不受pH,温度,有机溶剂和其他变性剂的影响。下表列出了常用链霉亲和素和生物素的解离办法及效率(基于游离生物素,与偶联复合物的生物素数据有明显差异),用户也可根据自己样品的需求自行设定洗脱方式。
4. 洗脱后的样品客户可根据需求采用适当方法检测。
洗脱条件参照表:
| 洗脱温度和时间 | 洗脱溶液 | 洗脱效率 |
| 90℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.8% |
| 90℃ for 5min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.4% |
| 90℃ for 2min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.8% |
| 65℃ for 5min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.4% |
| 65℃ for 2min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 97.9% |
| 37℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 41.9% |
| 90℃ for 10min | H2O | 7.3% |
| 90℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 | 52.0% |
| 90℃ for 10min | 95%甲酰胺 | 35.9% |
| 90℃ for 10min | 30mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 95.5% |
| 90℃ for 10min | 80mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 97.3% |
| 90℃ for 10min | 140mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 95.4% |
使用举例:
利用链霉亲和素磁珠从总RNA中提取mRNA的方法
1. 取0.1-1mg的总RNA样品加入到无菌、无RNase的1.5ml离心管中,加入无菌去离子水至终体积为500μl(注:总RNA 量可低至50μg,但是在该条件下所提取得到的mRNA 常规电泳检测不到,需要采用RT-PCR进行微量检测)。
2. 将上步样品管于65℃温浴10min。
3. 加入3μl 生物素化的Oligo(dT)和13μl的20×SSC溶液到总RNA样品中,温和混匀,室温放置至完全冷却,这一步需要约10min左右。
4.预处理链霉亲和素磁珠:将链霉亲和素磁珠充分混匀后,取适量磁珠于1.5mL无菌、无RNase的离心管内,放在磁力架上,待磁液分离后,移除上清。加1mL 0.5× SSC 洗涤磁珠,放在磁力架上磁液分离,移除上清,重复两次。加100μl 0.5× SSC重悬链霉亲和素磁珠。
5. 将第3 步制备的总RNA 混合溶液加入到上步制备的已经洗涤好且重悬的链霉亲和素磁珠溶液中。
6.室温放置10min,期间每隔1-2min 轻柔混匀以防磁珠出现沉降现象。采用磁力架分离磁珠,小心移除上清,过程中不要触碰到磁珠,该步上清在确定mRNA已经结合并洗脱后再弃掉。
7. 加300μl 0.1×SSC溶液温和吹打或是轻弹洗涤磁珠,然后置于磁力架上分离磁珠,磁液分离后小心移除上清,重复三次,最后一步洗涤后尽可能移除所有上清液。
8. 加入100μl 无RNase 去离子水(洗脱液),温和吹打或轻弹离心管使磁珠和洗脱液充分混匀。65℃水浴2分钟。
9. 置于磁力架上分离磁珠,将上清转移到一个新的无RNase的离心管内,不要触碰到磁珠(注:如果在转移过程中将磁珠悬起,可将样品管置回磁力架上重新吸取上清)。
10. 回收洗脱液中的mRNA。
链霉亲和素磁珠提取生物素化IgG
1.预处理链霉亲和素磁珠:链霉亲和素磁珠的保存需要加入BSA以保持其活性,故在使用链霉亲和素磁珠之前要彻底除去磁珠储存缓冲液中的BSA、叠氮*和Tween20。使用前需用PBS缓冲液于30分钟之内清洗3次以使磁珠达到最佳使用效果。
注:在使用前必须彻底重悬链霉亲和素磁珠以保证最佳使用效果和重复性。如果磁珠出现结块现象请勿再继续使用。
2. 将生物素化的IgG 溶解于PBS,IgG浓度大于2mg/mL 较利于筛选。
3. 取100μl预处理过的链霉亲和素磁珠充分震荡混匀,置于磁力架上分离磁珠,去除上清,该过程尽量不要触碰到磁珠团。
4. 取500μl PBS 重悬磁珠,放于磁力架上,磁液分离后,移除上清,重复洗两次。PBS 重悬磁珠,使磁珠恢复到最初的浓度10mg/mL。
5. 将第2 步制备的IgG 加到磁珠管内,室温震荡反应30min。保持磁珠处于悬浮状态,以达到好的结合效率。反应结束后,置于磁力架上,磁液分离后,用移液器小心将上清移至一干净离心管内。注:该步上清可以用来检测未结合到链霉亲和素磁珠上的IgG浓度。
6. 加入1mL PBS溶液重悬淋洗磁珠,置于磁力架上,磁液分离后,移除上清,重复淋洗两次。
7. 选择合适的洗脱方式洗脱IgG。
北京现货Zetterqvist固定液怎么卖关键词:Zetterqvist固定液,Zetterqvist Fixative Solution,BTN131280
·葡萄球菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130842
英文名称:Staphylococcus RNA extraction kit
规格:50次
·大肠杆菌SURE化学感受态细胞
编号:BTN90208
英文名称:E.coli SURE Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌SURE菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。该菌株主要是用来克隆不稳定DNA结构如重复序列、二级结构(如Z-DNA)等。
菌株基因型:
| 基因型 | 表现型 |
| endA1 | 核酸内切酶I缺失 |
| gyr A96 | 具有*啶酮酸抗性 |
| lac | 不能利用乳糖 |
| rec B & rec J | DNA重组修复功能缺失 |
| relA1 | 允许在无蛋白质合成时有RNA合成 |
| sbcC | 允许基本重组 |
| supE44 | 抑制琥珀突变,为某些噬菌体必需 |
| thi-1 | 需要硫*才能生长 |
| umuC::Tn5 | 卡那霉素抗性 |
| uvr C | 不能切除变异碱基 |
| mcrA△(mcr CB-hsdSMR-mrr)171 | DNA甲基化系统缺失 |
| F’[ lacIlac Z△M15 Tn10 proAB+] | 提供α-互补所需的ω片断,具有四环素抗性 |
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
北京现货Zetterqvist固定液怎么卖关键词:Zetterqvist固定液,Zetterqvist Fixative Solution,BTN131280
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