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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量供应
- 供应商:
上海彩佑实业有限公司
- 检测范围:
6个月
- 检测方法:
ELISA
- 适应物种:
小鼠
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清血浆
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
试剂盒的检测原理:
参考图1,组织、细胞等样品表面的抗原先与一抗结合,后者再与生物素标记的二抗结合;按照适当比例将Streptavidin和生物素标记的辣根过氧化物酶(Biotin-labeled Horseradish Peroxidase, Biotin-HRP)或生物素标记的碱性磷酸酶(Biotin-labeled Alkaline Phosphatase, Biotin-AP)混合,形成网络状的SABC-HRP或SABC-AP (Streptavidin-Biotin Complex containing HRP/AP)复合物;接着二抗上标记的生物素再与SABC-HRP/AP结合,加入HRP/AP底物进行显色或发光反应即可检测到相应的信号。其中Streptavidin和Biotin-HRP/AP混合后形成网络状复合物是信号能被放大的关键,相当于一个待检测的生物素分子通过SABC-HRP/AP复合物的识别最终可以由很多个HRP/AP分子来显示其信号,从而达到了信号放大的效果。
图1. SABC试剂盒的检测原理图。图中以生物素标记的HRP为例,生物素标记AP的检测信号放大原理与其完全一致。

试剂盒检测效果:
参考图2和图3,免疫染色的信号可以轻松增强5倍以上!
图2. Hela细胞Tubulin免疫染色效果图。A. 阴性对照组(不加一抗)。B. SABC-HRP实验组。C. HRP标记二抗对照组。
图3. Hela细胞Tubulin免疫染色效果图。A. 阴性对照组(不加一抗)。B. SABC-AP实验组。C. AP标记二抗对照组。
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文献和实验)进行抗体的检测外,还应用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验,方法可用ELISA、IFA法。例如①制备抗黑色素瘤细胞的McAb,除用黑色素瘤细胞反应外,还应用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应,以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。② 制备抗重组的细胞因子的单克隆抗体,应首先考虑是否与表达菌株的蛋白有交叉反应,其次是与其它细胞因子间有无交叉。 2. McAb的Ig类与亚类的鉴定:一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时,已经基本上确定了抗体的Ig类型。如果用的是酶标
瘤细胞。将单个杂交瘤细胞分离,在体内或体外培养而分泌的抗体单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb或Mab)。单克隆抗体仅针对一种抗原决定簇,具有很高的特异性。单克隆抗体通常用抗原免疫小鼠制备。将免疫的脾细胞(含产生抗体的B细胞)与小鼠肿瘤细胞融合,分离杂交瘤细胞,接种于小鼠腹腔,产生的腹水中含有浓度很高的单克隆抗体。1.3 抗原抗体反应1.3.1 可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:Ag+Ab→Ag·Ab。.抗体的亲和力(affinity)是抗原
,于室温处理 1 小时进行终止。+4°C 环境下,将神经元细胞与神经元标志微管相关蛋白 2 (microtubule-associated protein 2,MAP-2) (英国剑桥Abcam,ab11267, HM-2,1:600 稀释)小鼠单克隆抗体共同孵育,孵育过夜。第 2 天,将细胞与山羊抗小鼠二抗(Alexa Fluor® 488 goat anti-mouse IgG (H+L) (Invitrogen,1:250 稀释)共同孵育。使用DMI6000 B 倒置显微镜(德国,Leica
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