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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 检测范围：
详见说明
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
仅供科研
- 适应物种：
小鼠
- 样本：
血清等
- 规格：
48T/96T
小鼠单克隆抗体Ig类/亚类鉴定(McAb Ig)ELISA试剂盒上海圻明生物优势现货供应。 更多产品说明书欢迎免费索取。长期大量现货供应。
仅供体外科研使用，不得用于临床诊断
【样本类型】血清、血浆、细胞上清
【产品规格】48T/96T
【检查方法】夹心法/竞争法
【贮存方法】2-8℃保存。 避免不必要的重复溶解
【有效期】6个月
小鼠单克隆抗体Ig类/亚类鉴定(McAb Ig)ELISA试剂盒实验前预备
1. 准备工作
①仔细阅读说明书：在操作前，务必详细阅读试剂盒的说明书，了解操作步骤、注意事项及安全提示。
②样品准备：按照说明书要求处理样品，如稀释、离心等，确保样品质量。
2. 操作步骤
①包被：将特异性抗体包被于微孔板底部，形成固相抗体。
②封闭：使用封闭液封闭非特异性结合位点，减少背景干扰。
③加样：加入待测样品或标准品，与固相抗体结合。
④孵育：在适宜的温度和时间内进行孵育，使抗原抗体充分反应。
⑤洗涤：彻底洗涤未结合的成分，减少非特异性结合。
⑥加酶标抗体：加入酶标二抗，与已结合的抗原形成复合物。
⑦再次孵育与洗涤：重复孵育和洗涤步骤。
⑧显色：加入底物，在酶的催化下发生显色反应，颜色深浅与待测物浓度成正比。
⑨终止反应与读数：加入终止液终止反应，使用酶标仪测定吸光度值。
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文献和实验抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同，如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被称为钩状效应（hookeffect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可能异常高的物质（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）时，应注意可测范围的最高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状
抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig 分五类，即 IgG、IgA、IgM、IgD 和 IgE。与免疫测定有关的 Ig 主要为 IgG 和 IgM。Ig 由两个轻链（L）和两个重链（H）的单体组成。Ig 的轻链是相同的，有 κ（kappa）和 λ（Lambda）两种型别。五类 Ig 的重链结构不同，这决定了它们的抗原性也不同。IgG 和 IgM 的重链分别称为 γ（gamma）链和 μ（mu ）链。 重链和轻链的 N 端的氨基酸排列顺序
抗体的检测外，还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制备抗黑色素瘤细胞的McAb，除用黑色素瘤细胞反应外，还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应，以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。②制备抗重组的细胞因子的单克隆抗体，应首先考虑是否与表达菌株的蛋白有交叉反应，其次是与其它细胞因子间有无交叉。 2．McAb的Ig类与亚类的鉴定 一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时已经基本上确定了抗体的Ig类型
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