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- 2025年12月09日
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利用miRNA产品及报告基因质粒载体体外验证miRNA靶基因。将miRNA mimic与pmiR-RB-Report™报告基因质粒载体共转目的细胞系，通过萤火虫荧光素酶的活性分析，即可获得miRNA对潜在靶基因的调控作用的验证数据。
pmiR-RB-Report™报告基因质粒载体转录后可形成萤火虫荧光素酶与靶基因3’UTR区域组合而成的特殊mRNA，如果miRNA mimic能够与包含靶基因3’UTR的mRNA互补结合，则荧光素酶的表达活性也收到显著调控，故通过检测荧光素酶的荧光强度即可定量分析miRNA对靶基因的mRNA调控效果。
由于pmiR-RB-Report™报告基因的3’UTR长度不一，大多数长度为1～2.5kb之间。一般建议构建长度不超过2.5kb，同时建议构建单位点突变载体。将pmiR-RB-Report™ h-AKT1报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-146a mimic (50nM)共转A549细胞系， 采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-146a对AKT1 3’UTR有显著调控作用。将pmiR-RB-Report™ h-BCL2报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-9 mimic (50nM)共转A549细胞系，采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-9对BCL2 3’UTR有较明显调控作用。
客户提供：
需要验证的miRNA和靶基因
我们提供：
1）miRNA生物信息学分析
2）靶基因3’-UTR双荧光素酶野生型载体构建：
3）靶基因3’-UTR双荧光素酶突变型载体构建
4）miRNA 与双荧光素酶载体共转染及检测
5) 提供详细的检测结果和实验报告
pmiR-RB-Report™报告基因质粒载体转录后可形成萤火虫荧光素酶与靶基因3’UTR区域组合而成的特殊mRNA，如果miRNA mimic能够与包含靶基因3’UTR的mRNA互补结合，则荧光素酶的表达活性也收到显著调控，故通过检测荧光素酶的荧光强度即可定量分析miRNA对靶基因的mRNA调控效果。
由于pmiR-RB-Report™报告基因的3’UTR长度不一，大多数长度为1～2.5kb之间。一般建议构建长度不超过2.5kb，同时建议构建单位点突变载体。将pmiR-RB-Report™ h-AKT1报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-146a mimic (50nM)共转A549细胞系， 采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-146a对AKT1 3’UTR有显著调控作用。将pmiR-RB-Report™ h-BCL2报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-9 mimic (50nM)共转A549细胞系，采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-9对BCL2 3’UTR有较明显调控作用。
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需要验证的miRNA和靶基因
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1）miRNA生物信息学分析
2）靶基因3’-UTR双荧光素酶野生型载体构建：
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4）miRNA 与双荧光素酶载体共转染及检测
5) 提供详细的检测结果和实验报告
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