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- 2025年07月16日
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上海经科化学科技有限公司
- 服务名称：
甲基化检测MSP实验服务
- 规格：
标本
分子生物学检测---免疫印迹检测/生化检测
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免疫印迹WB（普通蛋白）实验服务
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本公司还提供以下实验方面服务
“病理学”、“分子生物学”、“细胞生物学”、“图像分析”
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文献和实验和耐药性相关突变。 3.4 DNA 甲基化常用检测方法 近年来涌现出很多 DNA 甲基化的检测技术，目前依据对目标 DNA 的预处理手段可将甲基化检测技术分为 3 类： 3.4.1 基于限制性酶切预处理的甲基化检测技术 这种方法是利用甲基化敏感性限制性内切酶对甲基化区域不切割的特性，将 DNA 消化为不同大小的片段后再进行分析。常用的经典酶对是 Hpa II - Msp I（识别序列 CCGG ）。随后进行 Southern 或 PCR 扩增分离产物，以明确目标片段的甲基化
1. MSP原理：MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因组DNA，未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变，然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳，凝胶扫描观察分析结果。 此原理的关键在于3对特异引物的设计。引物序列设计在富含胞嘧啶区域以区别亚硫酸氢钠处理后转化的非甲基化的DNA与未转化的甲基化的DNA，在引物的3’端，至少含有3个CpG位点，以保证区别甲基化与非甲基化DNA
甲基化特异性 PCR(Methylmion Specific PCR，MSP)及其改进方法是检测基因甲基化的经典方法．MSP法的原理是首先用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶都被转化为 尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶则不变。然后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物并进行聚合酶链反应(PCR)扩增，最后通过琼脂糖凝胶电泳分析，确定与引物互 补的DNA序列的甲基化状态。MSP法灵敏度较高，应用范围广。MSP 实验流程： 抽提基因组DNA，并定量 （组织、细胞、全血、血浆/清等）亚硫酸
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