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上海经科化学科技有限公司
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Western Blot实验
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标本
普通蛋白;磷酸化蛋白;核蛋白、线粒体蛋白、膜蛋白 实验服务
Western Blot实验
产品介绍:
蛋白质免疫印迹法 (Western Blot ) ,简称WB ,是指通过SDS-PAGE胶将不同分子量的蛋白分离开,然后将目标蛋白转移到载体(PVDF)膜上,再利用抗原抗体的特异性结合,用特异性的一抗结合目标蛋白,用HRP标记的二抗结合一抗,再加以ECL发光液显色,检测目的蛋白在不同处理的样本中表达量的高低变化。
实验流程:
(1) 样本接收:新鲜组织、细胞或者细胞沉淀、变性蛋白;
(2) 实验步骤:样本制备—制胶—电泳—转膜—封闭—一抗孵育—二抗孵育—化学发光;
(3) 实验结果:原始胶片,原始扫描图片,整理图片,数据分析及报告;
注意事项:
1、组织要新鲜组织,取完材后要及时清洗组织上的血污;
2、备注清楚上样顺序及详细抗体信息;
3、确认所给样本编号和上样顺序一致
分子生物学检测---免疫印迹检测/生化检测
免疫印迹WB(普通蛋白)实验服务
免疫印迹WB(磷酸化蛋白)实验服务
免疫印迹WB(核蛋白、线粒体蛋白、膜蛋白)实验服务
IP实验服务
COIP实验服务
ELISA检测实验服务
生化检测实验服务
血常规(动物外周血)检测实验服务
化学发光实验服务
组织样本匀浆实验服务
引物合成实验服务
Real-time PCR检测实验服务
RT-PCR(电泳)实验服务
DNA/质粒实验服务
甲基化检测MSP实验服务
甲基化检测BSP实验服务
micRNA检测实验服务
质粒构建实验服务
质粒扩增实验服务
质粒提取实验服务
药效评价实验服务
本公司还提供以下实验方面服务
“病理学”、“分子生物学”、“细胞生物学”、“图像分析”
“免疫学”、“动物实验”、“蛋白质相关”、
实验要求、样本情况、收费标准、操作流程等详情请咨询我司客服!
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文献和实验zhangyuxianggx 各位western达人,本人在western操作中屡次失败,现有几个问题跟达人们请教一下: 1、我的蛋白是96kDa,选择8%的分离胶有没有问题? 2、配制浓缩胶我用的是0.5M Tris-HCL(PH=6.8),但是看到好多配方用的都是1.0MTris-HCL(PH=6.8),这个有没有什么影响? 3、转膜是用的300mA,40min,看着转膜后胶很干净,就一直用的这个电流和时间。但是最后膜上总是很乱,背景
Western blot 实验技巧精要 ——轻松获得高质量 western blot 条带图 Western blot 方法在 SCI 文章中出现的频率非常高,漂亮的 WB 电泳图可以给文章增色不少。但是 WB 实验的步骤琐碎,细节颇多,要想得到令人满意的结果还是需要花费很多时间和精力去摸索实验技巧的。 小编经过了一段时间的努力,已经可以比较轻松的实现用 WB 方法对磷酸化蛋白计算药物的 IC50 值(见下图)。 接下来,小编将结合自己的经验以及网上可以搜索
WB 作为传统的实验技术,在实验室中得到了广泛的应用。 讲座从 WB 的基础原理、实验流程及常见问题和解决方法等方面对此项技术进行全面的介绍,结合具体实验案例,深入浅出的对 WB 技术进行解析,无论实验新手还是富有经验的操作者,都可以从讲座中获得所需的知识,用于获得更为完美的 WB 实验结果。
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