抗酸染色实验

                                                                                                  抗酸染色实验服务

一、实验器材及试剂
1、 实验器材
2、 主要实验试剂
 
二、 实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，水洗。
2、抗酸染色：切片入抗酸染液中染色30min，流水冲洗；
3、背景分化：切片入1%的盐酸酒精快速分化1s，流水冲洗2min，镜检有无紫红色阳性菌；
4、硫酸分化：切片入硫酸快速分化1s，自来水洗，重复操作至阳性菌呈紫红色，背景无色。
5、苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。
6、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min-二甲苯 Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。
7、显微镜镜检，图像采集分析。

三、结果判读：
抗酸菌呈紫红色丝状，细胞核呈浅蓝色。

四、注意事项：
1、两次分化都应注意分化程度，分化过度，将抗酸菌的紫红色分掉，分化不足，背景红色。
2、苏木素复染过程中要浅染，不能影响抗酸菌的观察



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