- ￥150 - 420
- Cmbio
- 上海
- CM-6023K
- 2025年08月31日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
零下80度
- 保质期：
1年
- 英文名：
F-DH5αChemically Competent Cell
- 库存：
1000只
- 供应商：
上海淳麦
- 规格：
20*100ul
F-DH5α快速转化感受态细胞产品说明书
产品规格:
| F-DH5α | 10×100μl |
| pUC19(control vector) | 10pg/μl 10μl |
F-DH5α快速转化感受态细胞基因型：
F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1
gyrA96 relA1 phoA
F-DH5α快速转化感受态细胞简要说明：
CMbio-DH5α菌株是实验室最常用的感受态细胞。缺失核酸内切酶 (endA)，提高了质粒 DNA 的产量和质量；重组酶缺陷型 (recA)减少插入片段的同源重组概率，保证 了插入 DNA 的稳定性；lacZΔM15 的存在使 DH5α可用于蓝、白斑筛选-CMbio-
F-DH5α感受态细胞经特殊工艺制作，无需 42℃热激，37℃孵育步骤，只需冰浴，10min 内完成转化、涂板操作.
-CMbio-pUC19 质粒检测转化效率可达 1~5×10 8cfu/μg DNA。-CMbio-
F-DH5α快速转化感受态细胞操作说明：
1、提前 15 分钟将用到的筛选培养基平板拿到 37℃预热。-CMbio-
2、F-DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA（质粒或连接产物） 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,，冰中静置 5 分钟。-CMbio-
3、用 200 μl 枪将感受态细胞-DNA 混合物转移到已经 37℃预热的 LB 培养基上，涂均匀，表面无水渍。
4、将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少 15h。
快速热激转化操作方法 (25min,可提高转化效率)：
一、F-DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,，冰中静置 5 分钟。-CMbio-
二、42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟 (晃动会降低转化效率)。加入 700 μl 不含抗生素的 LB， 37℃，200 rpm 复苏 10 分钟，涂板 (均匀，表面无水渍)。-CMbio-
三、将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少 15h。
F-DH5α快速转化感受态细胞注意事项：
（一）F-DH5α快速转化感受态细胞也可进行热激操作，对于>7 kb 质粒的构建，为了提高转化效率可按以下步 骤操作：F-DH5α感受态细胞从-80℃拿出，插入冰中，5 分钟后，加入目的 DNA 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰中 静置 20 分钟。42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰中静置 2 分钟。加入 700 μl LB，37℃，200 rpm 复苏 30 分钟，涂 板。-CMbio-
（二）感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中 8 分钟内加入目标 DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存 放会降低转化效率，混入目的 DNA 时应轻柔操作。-CMbio-
（三）F-DH5α快速转化感受态细胞涂氨苄/羧苄青霉素抗性平板时效率较高，若涂卡那霉素或其他抗生素平板， 转化效率下降(因无孵育步骤，卡那霉素等对菌体毒性较大)。若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率，可按热激 转化操作，增加孵育步骤。
F-DH5α快速转化感受态细胞其他推荐：
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BJ5183 电转化感受态细胞 BJ5183-AD-1 电转化感受态细胞 DH10B 电转化感受态细胞 XL1-Blue 电转化感受态细胞 stable 电转化感受态细胞 TG1 电转化感受态细胞EPI400感受态细胞 EPI400 电转化感受态细胞 BL21感受态细胞 BL21(DE3)感受态细胞 BL21(DE3)pLysS感受态细胞 BL21(AI)感受态细胞 BL21 Star(DE3)感受态细胞
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上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。
上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面，实力雄厚，拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类，共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面，拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类，极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
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文献和实验型信息可以判断目的质粒是否可以使用这个感受态细胞来进行扩增，以及是否可以进行目的实验。例如 DH5α基因型：F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44 , λ-, thi-1, gyrA96 , relA1。基因型信息中有 lacZΔM15，说明其表达产物可以与 PUC 质粒编码表达的β-半乳糖苷酶的α肽段实现α互补，因此可以选择用 DH5α感受态来扩增
法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
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