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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
T4
- 库存：
大量
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 供应商：
华因康
- 规格：
40,000U—200,000U
该酶催化契合的双链DNA或RNA的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口，但对单链DNA或RNA无连接作用。
应用
来源
E.coli重组表达。
活性单位定义（Cohesive End Unit）
1CEU指在20μl 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中，在16℃反应条件下，30min能使50%的经Hind III 消化的λDNA片段[5' 端浓度为0.12μM（300μg/ml）]连接所需的酶量。
质量控制
双链内切脱氧核糖核酸酶检测：50μl反应体系中，1μl酶和1μg pUC57，37℃孵育4h，0.8%琼脂糖凝胶检测。结果显示无切口或线性DNA存在，表明该产品通过此项测试。
内切及外切脱氧核糖核酸酶活性检测：20μl反应体系中，包含200ng双链的寡核苷酸，1 μl酶，37℃孵育4h，反应产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测并成像分析实验结果。结果显示寡核苷酸没有降解，表明该产品通过此项测试。
DNA 末端完整性和克隆效率污染活性的检测：将200ng pUC57酶切片段混合物（pUC57/HindⅢ，pUC57/PstⅠ，pUC57/SmaⅠ），1μl酶，37℃孵育4h，转化后进行蓝白斑筛选。白斑比例低于3%时，产品合格。
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【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
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