TEM8 mRNA原位杂交试剂盒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")TEM8 mRNA原位杂交试剂盒价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：TEM8 mRNA原位杂交试剂盒价格
产地：国产|进口
编号：ZN1366
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.TEM8 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
TEM8的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

欲咨询购买TEM8 mRNA原位杂交试剂盒价格，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：
昆布多糖 Sodium glycollate 9008-22-4
ARB14107 大鼠类胰蛋白酶(TPS)免费代测 
Kodak F-5定影粉剂   1L
ARB11064 人转甲状腺素蛋白(TTR)含量分析 Human transthyretin,ttr ELISA KIT
ARB13056 小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)Elisa定量检测 Mouse transferrin receptor,tfr ELISA KIT
ARB12565 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)elisa检测 Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,gdnf ELISA KIT
50-70-4 D-山梨醇 D-Sorbitol
1,5二磷酸核酮糖 Benzoresorcinol 14689-84-0
HC0148 封口膜
聚季铵盐-10 Neomycin sulfate 68610-92-4或54351-50-7
NF-266 APOA-1,APOB标准血清
D-精*酸 Boc-L-serine 157-06-2
17502-048 N-2
柠檬酸—柠檬酸*缓冲液(0.1mol/L,pH4.5)   500ml
B0401 标准新生牛血清(辐照灭菌)
ARB11593 人副流感病毒(HPIV)抗原ELISA检测服务 Human parainfluenza virus ,hpiv ELISA KIT
PY02-367  紫红胆盐葡萄糖琼脂(USP、EP)  250克  
ARB10949 人谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)酶免分析 Human glutathione peroxidase,gsh-px ELISA KIT
高效核酸转染试剂 
D-来苏糖 4-Methoxysalicylaldehyde 1114-34-7
ARB10220 人β乳球蛋白(β-Lg)Elisa方法检测 Human β lactoglobulin,β-lg ELISA KIT
TEM8 mRNA原位杂交试剂盒价格关键词：ZN1366,TEM8 mRNA原位杂交试剂盒,百奥莱博

ARB13725 兔热休克蛋白20(HSP-20)Elisa分析 Rabbit heat shock protein 20,hsp-20 ELISA KIT
BL1436 1M Tris-HCl(PH=8.0)
4-**甲*(代"酸") Ferrous oxalate dihydrate 456-22-4
Church缓冲液   100ml
BL1227 D-Hanks,不含**,含酚红(HBSS)
ARB12621 大鼠维生素B12(VB12)酶免分析 
PY02-022  乳糖发酵培养基  250克  
ARB11382 人总前列腺特异抗原(tPSA)免费代测 Human total prostate s pecific antigen,tpsa ELISA KIT
ARB12472 大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)含量检测 Rat cytosolic phospholipase a2,cpla2 ELISA KIT
ARB10848 人抗组蛋白抗体(AHA)检测服务 Human anti-Histone antibody,aha ELISA KIT
DL-丝*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Hyaluronidase 5619-04-5
间甲氧基*乙*(代"酸") Carboxymethyl cellulose CM-23 1798-09-0
8002-43-5 L-α-Phosphatidylcholine 卵磷脂
乙酸铵溶液(1mol/L,无菌)   500ml
TEM8 mRNA原位杂交试剂盒价格关键词：ZN1366,TEM8 mRNA原位杂交试剂盒,百奥莱博

77-92-9 柠檬酸
PY02-384  R2A琼脂  250克  
ARB13699 兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)代做ELISA实验 Rabbit urokinase-type plasminogen activator receptor,plaur/upar ELISA KIT
ARB13625 兔子神经生长因子(NGF)含量检测 Rabbit nerve growth factor,ngf ELISA KIT
F020202 山羊抗小鼠IgG1抗体 Goat Anti-Mouse IgG1
黏蛋白染色液(温和甲基化法)   2×50ml
9012-54-8 纤维素酶R-10 Cellulase R-10
ARB10693 人肌养蛋白(dystrophIn)elisa检测 Human dystrophin ELISA KIT
血液总RNA提取试剂盒 
ARB10174 人X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良(SEDL)血清中含量检测 Human x-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda,sedl ELISA KIT
变色酸 Betaine 148-25-4
ARB13248 小鼠硫*(代"酸")软骨素elisa检测操作说明书 Mouse chondroitin sulfate,cs ELISA KIT
二*基联*(代"*")*(代"胺") Guanosine 531-91-9
CYB165029 生物素化兔抗鸡IgG(Y)
ARB12128 大鼠叶酸(FA)免费代测 Rat folic acid,fa ELISA KIT
载玻片核酸酶清洗试剂盒   3×100ml
ARB11079 人肾上腺皮质抗体(ACA)含量分析 Human adrenal cortex antibody,aca ELISA KIT
TB固体培养基粉剂(Terrific Broth)   1L
PY01-082  胃蛋白胨  250克  
碘硝基*化四氮唑蓝 Benzoin 146-68-9

北京百莱博科技有限公司是基因结构和功能产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购TEM8 mRNA原位杂交试剂盒价格。