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- 英文名:
Endoproteinase Glu-C Sequencing Grade
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嵘崴达
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2-8度
- 规格:
50 μg
内蛋白酶 Glu-C 测序级
Endoproteinase Glu-C Sequencing Grade
Specificity
特异性水解 Glu(碳酸氢铵,pH 7.8 或乙酸铵缓冲液,pH 4.0)或 Glu 和 Asp(磷酸盐缓冲液,pH 7.8)羧基侧肽键的丝氨酸蛋白酶。以胰岛素(胰岛素 B ox )的氧化 B 链为底物,确证了胞内蛋白酶 Glu-C 测序级的特异性。孵育高浓度的胞内蛋白酶 Glu-C 测序级(1 份(按重量计)酶和 10 份(按重量计)胰岛素 B ox ),以检测痕量杂质,例如污染蛋白酶。
热灭活: 大多数测序级蛋白酶通过煮沸 5 min 停止。
Application
使用胞内蛋白酶 Glu-C 测序级进行蛋白质结构分析和序列分析。
Features and Benefits
不含可能干扰 RP hPLC 肽分离的杂质。
Preparation Note
工作浓度: 1/100 至 1/20 (w/w)
最小量 1~5μg 胰岛素 B ox,使用 Column Aquapore RUP 300,4.6 x 100 nm,7μm 可检测到足够的水平。
工作液: 推荐用双蒸水配制溶剂。
除水外,未检测其他溶剂;罗氏推荐使用 50 mM Hepes,pH 7.8。
储存条件(工作液): + 2 至 + 8°C 下储存 1-2 天。
稳定性: + 2 至 + 8°C 下储存 12 个月,在质量标准范围内;干燥储存。
Reconstitution
冻干内蛋白酶 Glu-C 测序级在双蒸馏水中重构。 为避免自溶,培养温度不应超过 25°C。
| 11420399001 | Endoproteinase Glu-C Sequencing grd. | 50ug | |
| 11047817001 | Endoproteinase Glu-C Seq.-Grade | 3x50ug | |
| 11420429001 | Endoproteinase Lys-C Sequencin | 5 µg | |
| 10295892001 | Colcemid | 20 ml (10 µg/ml) sterile | |
| 11074440001 | Penicillin-Streptomycin | for 20 ml (500x), lyophilizate, sterile | |
| 11273973001 | QUICK SPIN G-50 DNA (100408) 5 | 50 columns | |
| 10269638001 | Collagenase/Dispase, 100mg | 100 mg |
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文献和实验光素和5'腺苷酰硫酸,这样在 每一个小孔中每当有 聚合酶 将核苷酸掺入时都会发光。最后用腺苷三磷酸双磷酸酶洗涤去掉多余的核苷酸。(b) Solexa测序仪使用桥式PCR直接在芯片上进行模板片段扩增,然后同时加入四种经过修饰的脱氧核苷酸,每一个核 苷酸都携带一种荧光基团和一个可被去除的终止基团。经过修饰的DNA 聚合酶 催化引物延伸测序反应。采集图像, 然后切除荧光标记基团和终止基团,重复上述反应,完成测序。(c)SOLiD测序仪和Polonator测序仪使用微乳 液PCR法扩增
xuquan897 求教一个关于测序的问题:我的大概1000bp左右的质粒拿去测序公司做正反向测序,结果正向测的很好,而反向给的报告是双峰,结果见下图,不知道是什么原因呢?请教各位高手。多谢多谢! [img]file:///C:\Documents and Settings\yuanyuan.xu\Application Data\Tencent\Users\183410312\QQ\WinTemp\RichOle\%`GN))OT@@(C
,将PCR 产物进行PAGE 纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进行测序,便可解决。 问题图3(测序引物有碱基缺失) 测序引物有碱基缺失(一般是引物的5'端缺失),和模板的碱基缺失即图1 有些类似,所不同的是模板碱基缺失一般是在一段正常测序序列后才出现移码,而引物碱基缺失的话,则从测序一开始就出现移码,表面在图形上便是一开始就是严重的峰形重叠。 解决方法:重新合成引物,或将引物进行PAGE 纯化(注:好多公司虽然称提供的引物为PAGE级,但是,嘿嘿……) 2、克隆测序时出现峰形重叠
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