E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒价格
产地：国产|进口
规格：100T
编号：ZN0430
品牌：百奥莱博
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
E2F-5的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

欲了解更多E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
65-71-4 Thymine   胸腺嘧啶
BL0812 HRP标记人纤维蛋白原抗体
ARB13148 小鼠神经生长因子(NGF)elisa检测 Mouse nerve growth factor,ngf ELISA KIT
5-胞苷三磷酸二*盐 D-Sorbitol 36051-68-0
Taq Plus DNA Polymerase 
124-20-9 Spermidie  亚精胺(精咪)
BL0876 兔抗人IgG免疫血清
BTN100947 环状DNA全基因组扩增试剂盒 Circular DNA WGA Kit
甲基黄指示剂   100ml
F030802 BIOTIN标记小鼠抗人IgG Fc抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG(FC)*BIOTIN
4-N,N-二甲基*基偶氮*-4`-异硫*酸酯 Phloroglucinol 7612-98-8
尿酸酶 1-Naphthylamine 9002-12-4
阿尔新蓝8GX Phenyl Sepharose CL-4B 75881-23-1
柠檬酸* Itaconic acid 5785-44-4
PY02-431  强化梭菌培养基  250克  
磷钨酸* GAPDH 51312-42-6
E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒价格关键词：ZN0430,百奥莱博,E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒

枸橼酸*抗凝剂(4%,无菌)   100ml
72-18-4 L-Valine  L-缬*酸
锌试剂 Maltitol 62625-22-3或56484-13-0
N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺 Citrinin 21715-90-2
Gey"s红细胞裂解液 Gey"s Lysis Buffer  100ml|500ml
ARB10868 人抗核周因子抗体(APF)含量检测 Human anti-perinuclear factor,apf ELISA KIT
BTN100923 甲基化专一性PCR试剂盒 Methylation Specific PCR Kit
J0314 山羊抗人IgM(H+L)抗血清 1ml/10ml
25389-94-0 Kanamycin   硫*(代"酸")卡那霉素
PY02-066  抗生素检定培养基Ⅳ号  250克  
β-葡聚糖酶 Span 40 9025-70-1
磷钨酸 Adenine sulfate 12501-23-4
ARB12819 小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA检测服务 Mouse diamine oxidase,dao ELISA KIT
L-半胱*酸盐*(代"酸")盐无水物 GPDA 52-89-1
N6-*甲酰基腺嘌呤 Ethanethioamide 4005-49-6
小鼠细胞分离液 Z-D-alanine
膜蛋白提取试剂盒 Membrane protein extraction kit  50T|100T
ARB10706 人多巴胺脱羧酶(DDC)含量测试 Human dopamine decarboxylase,ddc ELISA KIT
E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒价格关键词：ZN0430,百奥莱博,E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒

BL1380 20×SSC PH7.4
ECL发光Marker 20次
黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐 PUC19 84366-81-4
BL1073 次高分子量蛋白标准
PY02-412  WL营养琼脂  250克  
异染颗粒染色液(改良Albert法)   2×20ml|2×50ml
ARB11301 人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)尿液中含量检测 Human noradrenaline bitartas,ne-b ELISA KIT
9001-37-0 Glucose oxidase 葡萄糖氧化酶
*基黑10B 3-Aminobenzoic acid 1064-48-8
BTN130983 气相RNase清除剂 Air RNase Erasol
BTN120693 溶液 Mitomycin Solution
ARB12006 大鼠SmAd1 elisa检测操作说明书 Rat mothers against decapentaplegic homolog 1,smad1 ELISA KIT
3,5-二*水杨酸 DL-Malic acid 320-72-9
BTN100915 SDS-PAGE预制胶 Instant SDS-PAGE Gel
ARB10413 人可溶性瘦素受体(sLR)elisa测定使用说明书 Human leptin soluble receptor,slr ELISA KIT
PY02-050  高盐甘露醇培养基  250克  
红细胞稀释液(计数用)   100ml
J0310 兔抗鸡IgY(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB11109 人乳头瘤病毒18抗体(HPV18)ELISA检测服务 Human papillomavirus18,hpv18 ELISA KIT
ARB13605 兔子肾上腺髓质素(ADM)定量分析 Rabbit soluble endothelial protein c receptor,sepcr ELISA KIT

我公司正在打折促销基因结构和功能全系列产品，恭候您的咨询选购E2F-5 mRNA原位杂交试剂盒价格。